氧化酶試紙容易受到空氣中氧、水分等因素影響,保存或操作不當會導致試驗出現偏差,因此對氧化酶試紙進行簡要介紹。
一、試驗原理:
1.氧化酶(細胞色素氧化酶)是細胞色素呼吸酶係統的終末呼吸酶。具有氧化酶的細菌,首先使細胞色素C氧化,再由氧化型細胞色素C使二甲基對苯二胺氧化,生成有色的醌類化合物。氧化酶試紙含有二甲基對苯二胺,通過顏色反應可以檢測細菌是否含有氧化酶。
二、試驗方法:
1.先將氧化酶試紙用無菌水浸濕,再用細玻璃棒或一次性接種針挑取單個菌落塗在試紙上。觀察顏色反應,藍色為陽性,2min內不變色為陰性。
三、注意事項:
1.二甲基對苯二胺易氧化,氧化酶試紙應裝在深色瓶中,並於2-8℃保存。正常情況下氧化酶試紙應為白色,若變色則不宜使用。
2.鐵、鎳鉻絲等金屬可催化二甲基對苯二胺變色,若用其來挑取菌苔,會出現假陽性,故需要用玻璃棒或一次性接種針。
3.在氧化酶試紙上滴加無菌水,以剛剛浸濕為宜。若試紙過濕則會阻礙空氣與菌苔接觸,從而延長了反應時間,造成假陰性。
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