目前培養基的主要滅菌方式有濕熱高壓滅菌、過濾除菌、加熱滅菌等。高壓滅菌為最常用的滅菌方式,但也有部分培養基無需高壓滅菌,隻需煮沸滅菌即可,如VRBA、VRBGA、VRBDA、XLD瓊脂、SS瓊脂、BS瓊脂、DHL瓊脂、HE瓊脂、XLT4、紫紅膽鹽瓊脂、四號瓊脂、慶大黴素瓊脂、沙門氏菌顯色、O157顯色等培養基等。針對此類培養基,特作出如下說明。
本公司的培養基標簽用法中有時會寫“稱取本品Xg,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中……無需高壓滅菌”字樣,並未寫需要多少度滅菌多少分鍾,此時就需要注意不要用高壓滅菌鍋將培養基進行滅菌,否則就不得不重新配製了。
正確的滅菌方式應為:
1、水浴加熱溶解
使用玻璃容器即可。稱取適量幹粉培養基加入蒸餾水中,置於沸水浴中,在水浴加熱的過程中時常攪拌或搖動培養基使之受熱均勻,約25min~30min後可以看到培養基的內部是澄清透亮的,無瓊脂粒的存在,此時就可以冷卻至所需溫度傾注平皿。
2、電磁爐加熱溶解
使用耐電磁爐加熱的容器(如搪瓷缸)。稱取適量幹粉培養基加入蒸餾水中,將搪瓷缸放在電磁爐的中央,打開電磁爐開關,開始加熱,用玻璃棒持續攪拌培養基以防底部焦糊,約1-2分鍾之後,培養基開始沸騰,產生了大量泡沫狀物質並上湧,此時迅速將搪瓷缸拿開(以防飛濺出來),待泡沫消掉之後(約十幾秒鍾),再將搪瓷缸放上,沸騰起泡沫後再次拿開,如此反複使培養基沸騰4遍即可(如還有明顯瓊脂粒未溶解,可加沸一次),冷卻至所需溫度傾注平皿。
3、電爐加熱溶解
使用耐加熱的玻璃製品。此方法與方法2的過程一致,使培養基沸騰4遍即可。
注意事項:
1、此方法僅限實驗室配製培養基使用。
2、配製量不宜過多,建議配製量在500ml以下,配製的培養基體積建議在容器體積的60%以下。
3、操作時需做好防護,如戴上棉手套,以防不小心燙傷。
4、使用電爐加熱時需注意防止玻璃容器受熱後碎裂。
5、工業化生產工藝需自行進行摸索。
此方法的最終解釋權歸青島高科技工業園betway必威西汉姆联生物技術有限公司所有。
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
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