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實驗用染色液的配製



錄入時間:2008-10-21 14:14:17 來源:google

1.黑色素液 水溶性黑素10g,蒸餾水100mL, 甲醛(福爾馬林)0.5mL。可用作莢膜的背景染色。
2.墨汁染色液  國產繪圖墨汁40mL,甘油2mL,液體石炭酸2mL。先將墨汁用多層紗布過濾,加甘油混勻後,水浴加熱,再加石炭酸攪勻,冷卻後備用。用作莢膜的背景染色。
3.呂氏(Loeffier)美藍染色液
A液:美藍(methylene blue, 又名甲烯藍)0.3g, 95%乙醇30mL;
B液:0.0l% KOH l00mL。
混合A液和B液即成,用於細菌單染色,可長期保存。根據需要可配製成稀釋美藍液,按1:10或1:100稀釋均可。
4.革蘭氏染色液
(1)結晶紫(crystal violet)液:結晶紫乙醇飽和液(結晶紫2g溶於20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h後過濾即成。此液不易保存,如有沉澱出現,需重新配製。
(2)盧戈(Lugol)氏碘液:碘1g,碘化鉀2g,蒸餾水300mL。先將碘化鉀溶於少量蒸餾水中,然後加入碘使之完全溶解,再加蒸餾水至300mL即成。配成後貯於棕色瓶內備用,如變為淺黃色即不能使用。
(3)95%乙醇:用於脫色,脫色後可選用以下(4)或(5)的其中一項複染即可。
(4)稀釋石炭酸複紅溶液:堿性複紅乙醇飽和液(堿性複紅1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸90mL混合溶解即成堿性複紅乙醇飽和液),取石炭酸複紅飽和液l0mL加蒸餾水90mL即成。
(5)番紅溶液:番紅O(safranine,又稱沙黃O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解後可貯存於密閉的棕色瓶中,用時取20mL與80mL蒸餾水混勻即可。
以上染液配合使用,可區分出革蘭氏染色陽性(G+)或陰性(G-)細菌,G-被染成藍紫色,G+被染成淡紅色
5. 鞭毛染色液
A液:丹寧酸5.0g, FeCl3 1.5g,15%甲醛(福爾馬林)2.0mL,l%NaOH 1.0mL,蒸餾水l00mL;
B液:AgNO3 2.0g, 蒸餾水100mL。
待AgNO3溶解後,取出l0mL備用,向其餘的90mLAgNO3中滴加NH4OH,即可形成很厚的沉澱,繼續滴加NH4OH至沉澱剛剛溶解成為澄清溶液為止,再將備用的AgNO3慢慢滴入,則溶液出現薄霧,但輕輕搖動後,薄霧狀的沉澱又消失,繼續滴入AgNO3,直到搖動後仍呈現輕微而穩定的薄霧狀沉澱為止,如霧重,說明銀鹽沉澱出,不宜再用。通常在配製當天便用,次日效果欠佳,第3天則不能使用。
6. 0.5%沙黃(Safranine)液:2.5%沙黃乙醇液20mL,蒸餾水80mL。將2.5%沙黃乙醇液作為母液保存於不透氣的棕色瓶中,使用時再稀釋。
7. 5%孔雀綠水溶液:孔雀綠5.0g,蒸餾水100mL。
8. 0.05%堿性複紅:堿性複紅0.05g,95%乙醇100mL。
9.齊氏(Ziehl)石炭酸複紅液:堿性複紅0.3g溶於95%乙醇l0mL中為A液:0.01%KOH溶液l00mL為B液。混合A、B液即成。
10.姬姆薩(Giemsa)染液
(1)貯存液:稱取姬姆薩粉0.5g,甘油33mL,甲醇33mL。先將姬姆薩粉研細,再逐滴加入甘油,繼續研磨,最後加入甲醇,在56℃放置1~24h後即可使用。
(2)應用液(臨用時配製):取1mL貯存液加19mL pH7.4磷酸緩衝液即成。亦可取貯存液:甲醇=1:4的比例配製成染色液。
11.乳酸石炭酸棉藍染色液(用於真菌固定和染色)  石炭酸(結晶酚)20g,乳酸20mL,甘油40mL,棉藍0.05g,蒸餾水20mL。將棉藍溶於蒸餾水中,再加入其他成分,微加熱使其溶解,冷卻後用。滴少量染液於真菌塗片上,加上蓋玻片即可觀察。黴菌菌絲和孢子均可染成藍色。染色後的標本可用樹脂封固,能長期保存。
12. 1%瑞氏(Wright’s)染色液:稱取瑞氏染色粉6g,放研缽內磨細,不斷滴加甲醇(共600mL)並繼續研磨使溶解。經過濾後染液須貯存一年以上才可使用,保存時間愈入,則染色色澤愈佳。
13.阿氏(Albert) 異染粒染色液:
A液:甲苯胺藍(toluidine blue)0.15g,孔雀綠0.2g,冰醋酸lmL,95%乙醇2mL,蒸餾水100mL;
B液:碘2g, 碘化鉀3g,蒸餾水300ml。
先用A液染色1min,傾去A液後,用B液衝去A液,並染1min。異染粒呈黑色,其他部分為暗綠或淺綠
   
   

 

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