1 設備與材料
1.1 低溫冰箱：-70℃
1.2 高壓滅菌器。
1.3 多孔玻璃珠（或素燒瓷珠）：直徑2~3mm。
1.4 商業化細胞凍存管（可選）。
2 操作步驟
2.1 將直徑為2-3mm的瓷珠分裝到小螺旋帽瓶中（每瓶最多裝30粒）製成冷凍管，高壓滅菌。
2.2 標記冷凍管。
2.3 在無菌狀態下打開冷凍管。
2.4 在所保藏菌種的最適營養條件下將細胞培養至穩定期或成熟期，進行純度檢查後，將菌株新鮮培養物加入到培養基中製成混懸液，無菌操作將混懸液轉入到冷凍管中。
2.5 封好冷凍管並顛倒四至五次乳化菌種培養基混懸液，切勿渦旋振蕩。
2.6 菌種吸附於瓷珠上後，將多餘的混懸液吸出。
2.7 也可使用商業化的細菌凍存管，此時應按照產品說明書進行操作。
3 保藏
將冷凍管存於-70℃。
4 保藏周期
可保存10年。
5 恢複培養
5.1 常用培養基參見附錄G，在無菌條件下打開冷凍管，用無菌真或接種環取出一粒瓷珠，封好冷凍管並盡快將其送回低溫條件下保存。
5.2 菌種吧哦攢瓷珠可直接接種於固體培養基或適量的液體培養基中。
6 注意事項
注意事項包括：
a 為使菌種長期穩定保存，在冷凍管使用過程中要注意無菌操作。
b 在生物安全櫃中進行菌種保存和複蘇等操作。
c 在處理應用過的冷凍管時應注意生物安全。
