1 菌片製備
金黃色葡萄球菌ATCC 29213在胰酶大豆瓊脂上36℃±1℃下培養18-24h，將2-3個菌落接種至3ml胰酶大豆肉湯中，在36℃±1℃下培養18-24h。用蛋白腖水1:10稀釋至濃度為1×104CFU/mL~4×104CFU/mL，對最終菌懸液進行計數。
打開無菌袋取出仍貼附在智商的聚氨酯膜，將載菌材料片的可浸濕聚氨酯膜麵朝上放在潔淨度盤子上，為了便於操作，用雙麵膠帶將載菌材料片的四角固定於盤子上。用培養皿蓋作為模板在載菌膜上化出一個相應的區域，在該區域塗布1.0ml金黃色葡萄球菌懸浮液，然後將菌片至於56℃幹燥大約30min，在幹燥期間采用消毒的玻璃塗布器在載菌膜上繼續塗布菌懸液，以使菌液均勻分布。
菌片製備好後當日使用。
2 狀態調節
如需要，按照GB6529對試件進行狀態調節，也可在標準正常室溫條件下進行狀態天界和試驗。狀態調節的方法應記錄在試驗報告中。
3 試驗設定
調節控製杆上配重，使試驗指施加到瓊脂上的力值為3N±0.02N。
將第一個瓊脂培養皿放在轉盤上。
4 材料應用
用下列計數：采用一個由內、外環組成的圓形砝碼，總重800g±1g對材料施加標準的繃緊力。將圓柱放在內環中央，再將試件覆蓋在圓柱體和內環上，將除去貼附紙後的菌片染菌麵向下放在試件上。最後在聚氨酯膜上覆蓋一層HDPE膜，向下推緊外環，使三層材料牢固的加在兩個環之間。
5 試驗
將上述環組件輕輕搭放在第一個去下蓋子的瓊脂培養皿上，鋼環自由懸放於旋轉盤的外麵，將試驗指置於皿口內測的HDPE膜上，這樣試件可與瓊脂表麵接觸。試驗指按上述規定施加3N壓力，是儀器運行15min。
15min後立即取下環套件放在一邊。
從旋轉盤上取下第一個培養皿並放上皿蓋。馬上將第二個培養皿和環套件放在旋轉盤上。
對後麵的四個培養皿用同一個環套組件執行上述步驟。
五個培養皿完成試驗後，取下菌片並棄去，將試件反轉，上麵朝下用HDPE膜覆蓋。
在第六個培養皿上操作15min,即完成第一個平行試驗組。
其餘4片試件同樣按上述方法各運行六個培養皿各15min，每片試件使用一片新鮮製備的菌片。
如果瓊脂表麵聚有液體，將其置於潔淨台上幹燥，將各瓊脂培養皿加蓋置於36℃±1℃培養48h。
計數每隻培養皿中金黃色葡萄球菌菌落數，培養皿中心15min半徑區域內的菌落數不計。
如果右一個皿或多個皿的計數大於750CFU（不包括上述的培養皿中心15min半徑區域內的菌落數），可重新驚醒試驗。如果重新試驗仍有一個或多個皿計數大於750CFU，表明該材料不可能具有足夠的屏障特性，可終止試驗。
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