我們采用4種不同培養基對水體中細菌進行培養,比較不同培養基與不同培養時間對水體中細菌總數檢測結果的影響,現報告如下。
1 材料與方法
1.1 培養基:營養瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白腖葡萄糖瓊脂、857培養基。
1.2 樣品來源:1998年1O月隨機采取本市便河居民點生活用自來水,便河河水及本院池塘塘水各9份。
1.3 方法:自來水采樣:先將采樣點自來水龍頭完全開放,放水5分鍾後調水流量,常規無菌采集水樣500ml,並加入無菌的3%硫代硫酸鈉溶液0.5ml以除去殘餘氯;河水與塘水采樣:先將密封狀態的無菌采樣瓶完全浸入水中後,掀開瓶塞,取樣約500ml。按照“GB4789.2—94微生物學部分”進行細菌總數檢測。每次以無菌方法分別吸取lml充分混勻的水樣於滅菌空平皿中,每份水樣各加8個,每2個為1組,隨即分別加入15ml滅菌並置45℃預溫的營養瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白腖葡萄糖瓊脂、857瓊脂並充分混勻,凝固後,置37~C培養24h、48h、72h、96h並分別記錄各培養基中菌落形成單位(CFU)均數。采用秩和檢驗進行統計學分析。
2 結果
2.1 4種方法培養後CFU均數結果:24h內4種培養基的CFU均數最低,隨培養時間延長而增高
2.2 不同時間培養後4種培養基的CFU均數的結果顯示:培養48h與72h、72h與96h組間CFU均數差異無顯著性;培養24h與48h,24h與72h、24h與96h、48h與96h各組間、CFU均數的差異有高度顯著性(P<0.01)。
2.3 4種培養基的CFU均數間兩兩比較:除營養瓊脂培養基與蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基之間CY'U均數的差異無顯著性外,肉浸湯瓊脂培養基與營養瓊脂培養基、肉浸湯瓊脂培養基與蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基、肉浸湯瓊脂培養基與857培養基、營養瓊脂培養基與857培養基、蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基與857培養基、CFU均數的差異均有高度顯著性(P<0.01)。
3 討論
3.1 本組4種培養基接種標本後,l~4天內CFU均數均隨培養時間延長而增加,培養24h與48h、72h、96h之間差異顯著(P<0.01);但培養48h與72h、72h與97h組問差異無顯著性。本結果顯示:雖然培養時間對CF’U數的變化有直接影響,但按“GB4789.2—94微生物部分”方法培養48h報告結果,能準確地檢測水體樣本的細菌總數。
3.2 按“GB4789.2-_94微生物部分”的方法,檢測細菌總數采用營養瓊脂培養基。本實驗采用包括營養瓊脂培養基在內的4種不同培養基進行檢測,結果表明,不同培養基之間CFU均數差異顯著,且肉浸湯瓊脂培養基>營養瓊脂培養基>蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基>857培養基。值得注意的是肉浸湯瓊脂培養基與營養瓊脂培養基的CY'U均數差異顯著,且培養至24h觀察結果時,肉浸湯瓊脂培養基表麵的菌落較大,易辨認,而營養瓊脂培養基上菌落較小,需培養48h後計數。這可能與前者用新鮮牛肉浸液配製,而後者用牛肉膏配製有關。因肉浸湯瓊脂培養基營養高於營養瓊脂培養基,更有利於水體樣本中細菌總數的檢測。
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