培養基和試劑
1、營養瓊脂培養基
2、10%(m/m)硫代硫酸鈉(Na2S2O3)溶液,一般情況下125ml的采樣瓶加0.1ml,加完後121℃高壓滅菌20min。
操作步驟
1、采樣瓶的要求和預處理:用於微生物分析的采樣要無酸、無堿、無毒的玻璃容器,采樣瓶在滅菌前加入足量的10%(m/m)硫代硫酸鈉(Na2S2O3)溶液,一般情況下125ml的采樣瓶加0.1ml,加完後121℃高壓滅菌20min。
2、用滅菌吸管吸取均勻水樣1ml,注入到滅菌平皿內,另取1ml注入另一滅菌平皿內作平行接種,取1ml加到9ml無菌生理鹽水中,作1:10稀釋,混勻後取2ml分別加到兩個無菌平皿內,每皿1ml。
3、將熔化並冷卻至45℃的營養瓊脂培養基傾注平皿內,每皿約15ml,領取一個不加樣品的平皿作空白對照,立即旋搖平皿,使水樣和培養充分混勻,待瓊脂凝固後翻轉平皿,置36℃±1℃恒溫箱內培養48h。
菌落計數方法
先用肉眼觀察,點數菌落數,然後再用放大5~10倍的放大鏡檢查,以防遺漏。記下各平皿的菌落數後,求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數,若平皿中有連成片狀的菌落或花點樣菌落蔓延生長時,菌落計數後乘以2,所得結果代表全皿菌落數。
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