1.含瓊脂培養基冷卻至25℃後已凝固,如何測定其ph?
答:有專門的固體培養基pH計,如Radiometer A /S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。".
2.PH計測培養基的PH好像有比較大的差別,應如何選擇PH計?(效價7.8的培養基我用普通理化室的PH計測定隻有7.0左右,不知道是否因為在高溫下測定(含瓊脂)
答:培養基應冷卻到20℃~25℃才可測量,另外PH計應按時校準。
3.生物指示劑對滅菌設備的性能,滅菌程序的驗證是隻驗證一次呢,而後進行定期驗證,如果生物指示劑換批號,是否要重新驗證?
答:應定期或不定期驗證一次,確保滅菌設備正常。生物指示劑更換批號,不需重新驗證。
4. 紫外線滅菌後,需要多久進去操作?
答:打開通風淨化設備,半小時後可入內操作。
5.孟加拉培養基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養黴菌和酵母菌?
答:根據中國藥典,采用玫瑰紅鈉瓊脂。
6.配製PH值7.0氯化鈉-蛋白腖緩衝液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導致培養基混濁了,這種情況緩衝液還能用嗎?
答:建議按正常溫度滅菌,混濁培養基建議不要使用。
7.培養基在冷藏中形成結晶怎麽處理?①銷毀 ②加熱再用 ③待冷卻完用
答:建議不要使用
8.融化的培養基為什麽不能再冷水中冷卻?
答:防止受熱不均引起結塊
9. 取菌後測PH:(25℃)培養基配製好測PH,取其中一瓶測PH,那這一瓶測完就不能用了,汙染了。
答:也可在無菌條件下取出適量測ph.
10. 配製分裝過程中能否使用不鏽鋼鍋?
答:我實驗室使用不鏽鋼鍋,目前未發現異常。
11. 對新購進無菌0.9%氯化鈉(500ml)能否再次滅菌?
答:能。但包裝完好,購入時間較短的無需滅菌。
12.“要定期對壓力表進行檢定(消毒鍋),檢定周期一般為半年”,這句話怎樣理解,是廠家應半年自己檢一次,還是有計量部門執行?
答:由計量部門計量,計量後應發有檢定證書。
13. 滅菌後,滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開,這段時間是否會造成過度滅菌。
答:自然冷卻過程已經計算在正常滅菌時間內了,不會造成過度滅菌。
14. 培養基常規質控有無強製檢定項目?目前我們所做項目有:ph、無菌檢查、生長檢查、是否符合藥典規定?
答:培養基應按2010版藥典檢查。
15. 培養基所用器具若使用濕熱滅菌,是否必須待幹燥後才可以使用?若烘幹或其它方法,中間過程怎樣防止微生物汙染?
答:如果是馬上使用且不是用於非水溶性供試液的製備及實驗,不一定要烘幹;否則,應幹燥後使用,滅菌及幹燥盡量在同一鍋裏進行,或用紗布和牛皮紙包紮緊密。
16. 培養基的避光儲存,是否配置好的培養基其全部放避光儲存?
答:最好都避光保存。無條件時,光敏感的培養基一定要。
17. 商品培養基幹粉說是加蒸餾水溶解,實際操作是否可以用純化水或注射用水?
答:隻要不含有任何可能抑製或影響微生物生長的物質的水均可。
18. 滅菌後的培養基是否都要測ph值?如何測定ph值?
答:每個製備批次的培養基都應測定ph,可采用ph試紙或ph計測量。
19. 培養基及器具滅菌可否同一設備同滅菌時間進行滅菌?
答:最好分開滅菌,條件不允許時可同爐滅菌,前提是都是潔淨無汙染的。
20. 培養基的保溫能否用60℃的培養箱,它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同?
答:不建議,因為溫度不同,長時間高溫影響培養基質量。
21. 培養基的貯存是否需要放置於2—10℃冰箱內?
答:需冷藏保存的培養基外包裝上會寫明。
22. 培養基滅菌後成份會有所蒸發減少,如何處理這個問題?
答:正常情況下蒸發量較少,可忽略不計。
23. 培養基融化後出現渾濁是有哪些方麵的原因引起的?應如何避免?
答:可能的情況有1培養基配置用水不符合規定;2滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢;3培養基儲存不當;4融化時沸騰時間較長等。
24. 準備好的培養基有效期如何驗證?
答:定期取出培養基驗證其無菌性,促生長能力等方麵。
25. 某些培養基無pH變化範圍,應該怎麽確定該培養基的pH範圍呢?
答:向培養基供應商索取。
26. 用於環境監控的培養基預培養時間如何確定?
答:與正常實驗的培養時間應一樣。
27. 培養基加熱的溫度一般超過100℃,是否符合要求?有無時間限製?
答:是指哪個環節?培養基滅菌溫度規定是超過100℃,有具體的時間要求,如果是指固體培養基使用前的加熱熔化,則完全融化即可,避免長時間高溫加熱。
28."培養基瓶的裝量,例:瓶裝量是500ml/瓶,裝量超過500ml/每瓶是否可行?
答:培養基的分裝量不得超過容器的2/3。"
29. 同一批培養基代表同一批號生產的培養基嗎?
答:是。
30. 培養基配製好滅菌後,在高壓容器中保溫降至50℃左右,可不可行?
答:建議最好不要,避免過度受熱。
31. 脫水培養基對濕度是否有要求?多少適宜?
答:按要求陰涼幹燥環境儲存即可。
32. 對照培養基何時能購買?
答:已經陸續開始銷售。
33. 培養基pH值測定溫度在25℃,這個溫度應怎麽控製?比如固體培養基,固體培養基使用過程中還能調節pH值嗎?
答:可水浴控製培養基溫度。
34. 配製培養基過程中,按說明書稱定量,加規定的純化水,煮沸溶解,為了避免煮沸過程總減少水分,是否要在配製過程適當增加水?比如陪硫乙醇酸鹽流體培養基.
答:可適量增加,自己掌握。
35. 商品培養基可否按照使用者驗證的參數滅菌?
答:理論上可以,請自行掌握。
36. 商品培養基一定要當天配當天用嗎?可否在一周內用完?
答:不是即配即用的培養基的話,儲存的當,可以使用。
37. 稱量培養基時,注意不要吸入粉末,這粉末是指何物?
答:就是你所稱量的幹粉培養基
38. 從中檢所購買的培養基還需要做適用性檢查嗎?
答:因為也是大批量生產的商業化培養基,應該做適用性檢查。
39. 若商品化的脫水培養基說明書上的處方與藥典上的標示的處方不符的,不能用嗎?
答:不能。
40. 用於調pH值用的酸、堿溶液經滅菌後會對Hcl溶液,NaOH溶液發生物理、化學變化嗎?如果有變化影響,會影響到所調培養基的質量嗎?
答:理論上會,但未經試驗證實。