1. 濃菌液的有效期該如何確定？
答：藥典沒有規定。可以通過實驗確定有效期。例如，在不同的時間點測定濃菌液的濃度，從而判斷其有效期。
2. 藥典要求菌液在製備後2小時內使用，若保存在2-8℃的菌懸液可在在24小時內使用，那我們在做驗證或陽性對照是要加一定量的菌就沒有時間進行平板計數了，該如何確保所加菌量準確？
答：藥典對稀釋菌液的使用期限作出規定，並不會影響操作過程中稀釋菌液的加入。即便不規定，也無法在準確知道菌液濃度的情況下加入試驗菌。菌液稀釋的實驗操作和加入菌液的實驗操作應該是在同一次實驗中完成的，要使加入的菌量符合藥典的規定，可以從濃菌液的製備方法、菌液稀釋的方法等方麵進行規範，也可以引入濁度比較的方法。
3. 菌懸液能否在倒平板之前確定菌含量？
答：活菌含量是無法確定的。總菌量可以通過比濁的方式確定。
4. 具體從哪些方麵進行菌種菌株的特性和純度確認？如何操作？
答：基層的微生物實驗室進行菌種純度確認可以考慮以下一些方麵：1）形態學鑒定，包括菌落形態和染色形態；2）生化鑒定，可以考慮使用API鑒定係統。
5. 黑曲黴凍幹菌種如何轉種，傳代？
答：與其他菌種一樣，所不同的是使用的培養基應改為改良馬丁瓊脂培養基。
6. 幹粉狀的是否可做第0代使用？
答：隻要是菌種保藏機構提供的凍幹保藏的菌種，可以確定為第0代。
7. 菌種每次傳代都要做純度、特性等的確認嗎？
答：從外部購入的菌種，在進入本實驗室的菌種保藏體係時，需要進行純度和特性的確認。以後的每次傳代，可以通過顯色培養基做簡單的確認即可。
8. 如采用低溫保存菌種，需購買哪些設備？能夠到省所進行實際操作培訓？
答：低溫冰箱，應能夠提供-70℃的低溫。可以到省所來培訓。
9. 做方法驗證時，工作用菌種能否同時操作，如何防止交叉汙染？
答：可以同時操作。避免交叉汙染的關鍵是無菌操作技術。
10. 是否等菌懸液的含菌數出結果後再做適用性等檢查？
答：沒有必要。可參見問題2。
11. 菌液製備中菌液是否都要驗證儲存期？
答：稀釋菌液可參考藥典規定。如要保存濃菌液，則需要驗證有效期。
12. 菌種CMCC是否可以用ATCC替代，從省所或中檢所購買的菌種是否每次都可以出具規範的COA?
答：中國藥典使用CMCC的菌種，並沒有規定可以使用其他等效的菌種。省所提供的菌種嚴格講屬於標準貯備菌種，無法提供ATCC這樣的COA。CMCC至今也無法提供這類證明。
13. 銅綠假單胞如何保藏？答：可以使用低溫冷凍保存的方法。14. 工作用菌液是否屬於亞培養或傳代一次？
答：工作用菌液應屬於一次傳代。
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