微生物的生長,除了受本身的遺傳特性決定外,還受到許多外界因素的影響,如營養物濃度、溫度、水分、氧氣、PH等。微生物的種類不同,培養的方式和條件也不盡相同。
1、影響微生物生長的因素:微生物的生長,除了受本身的遺傳特性決定外,還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長的因素很多,簡要介紹如下。
1) 營養物濃度
細菌的生長率與營養物的濃度有關:μ=μmax*C/(K+C)
營養物濃度與生長率的關係曲線是典型的雙曲線。
K值是細菌生長的很基本的特性常數。它的數值很小,表明細菌所需要的營養濃度非常之低,所以在自然界中,它們到處生長。然而營養太低時,細菌生長就會遇到困難,甚至還會死亡。這是因為除了生長需要能量以外,細菌還需要能量來維持它的生存。這種能量稱為維持能。另一方麵,隨著營養物濃度的增加,生長率愈接近最大值。
2)溫度
在一定的溫度範圍內,每種微生物都有自已的生長溫度三基點:最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。在生長溫度三基點內,微生物都能生長,但生長速率不一樣。微生物隻有處於最適生長溫度時,生長速度才最快,代時最短。超過最低生長溫度,微生物不會生長,溫度太低,甚至會死亡。超過最高生長溫度,微生物也要停止生長,溫度過高。也會死亡。一般情況下,每種微生物的生長溫度三基點是恒定的。但也常受其它環境條件的影響而發生變化。
根據微生物最適生長溫度的不同,可將它們分為三個類型:
a.嗜冷微生物:其是適生長溫度多數在-10℃-20℃之間
b.中溫微生物:其最適生長溫度一般在20℃-45℃之間
c.嗜熱微生物:生長溫度在45℃以上。
3)水分
水分是微生物進行生長的必要條件。芽孢、孢子萌發,首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物隻能在水溶液中生長,而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長發育的水分活性範圍內,均具有狹小的適當的水分活性區域。
4)氧氣:按照微生物對氧氣的需要情況,可將它們分為以下五個類型。
a.需氧微生物
這類微生物需要氧氣供呼吸之用。沒有氧氣,便不能生長,但是高濃度的氧氣對需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大於大氣中氧氣濃度的條件下生長。絕大多數微生物都屬於這個類型。
b.兼性需氧微生物
這類微生物在有氧氣存在或無氧氣存在情況下,都能生長,隻不過所進行的代謝途徑不同罷了。在無氧氣存在的條件下,它進行發酵作用,例如酵母菌的無氧乙醇發酵。
c.微量需氧微生物
這類菌是需要氧氣的,但隻在0.2大氣壓下生長最好。這可能是由一它們含有在強氧化條件下失活的酶,因而隻有在低壓下作用。
d.耐氧微生物
這類微生物在生長過程中,不需要氧氣,但也不怕氧氣存在,不會被氧氣所殺死。
c.厭氧微生物
這類微生物在生長過程中,不需要分子氧。分子氧存在對它們生長產生毒害,不是被抑製,就是被殺死。
2、培養方法
1)根據培養時是否需要氧氣,可分為好氧培養和厭氧培養兩大類。
好氧培養:也稱“好氣培養”。就是說這種微生物在培養時,需要有氧氣加入,否則就不能生長良好。在實驗室中,斜麵培養是通過棉花塞從外界獲得無菌的空氣。三角燒瓶液體培養多數是通過搖床振蕩,使外界的空氣源源不斷地進入瓶中。
厭氧培養:也稱“厭氣培養”。這類微生物在培養時,不需要氧氣參加。在厭氧微生物的培養過程中,最重要的一點就是要除去培養基中的氧氣。一般可采用下列幾種方法:
a.降低培養基中的氧化還原電位:常將還原劑如穀胱甘肽、硫基醋酸鹽等,加入到培養基中,便可達到目的。有的將一些動物的死的或活的組織如牛心、羊腦加入到培養基中,也可適合厭氧菌的生長。
b.化合去氧:這也有很多方法,主要有:用焦性沒食子酸吸收氧氣;用磷吸收氧氣;用好氧菌與厭氧混合培養吸收氧氣;用植物組織如發芽的種子吸收氧氣;用產生氫氣與氧化合的方法除氧。
c.隔絕阻氧:深層液體培養;用石蠟油封存;半固體穿刺培養。
d.替代驅氧 用二氧氣碳驅代氧氣;用氮氣驅代氧氣;用真空驅代氧氣;用氫氣驅代氧氣;用混和氣體驅代氧氣。
2)根據培養基的物理狀態,可分為固體培養和液體培養兩大類。
固質培養:是將菌種接至疏鬆而富有營養的固體培養基中,在合適的條件下進行微生物培養的方法。
液體培養:在實驗中,通過液體培養可以使微生物迅速繁殖,獲得大量的培養物,在一定條件下,還是微生物選擇增菌的有效方法。
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