分離
增菌後的EC增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍瓊脂平板
36℃±1℃培養18h-24h
麥康凱：無色至粉紅色，光滑、濕潤、突出、圓形、邊緣整齊
伊紅美藍瓊脂：紫紅色具黑心，有或無金屬光澤，光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊
初步生化
從選擇性平板上挑取5-10個菌落分別接種TSI、pH7.2尿素瓊脂和營養瓊脂小斜麵各一管， 36℃±1℃培養18h-24h
TSI斜麵產酸或不產酸，底層產酸，硫化氫陰性和尿素陰性的菌株，挑取營養瓊脂斜麵上生長的菌苔進行生化試驗、血清學分型
生化鑒定
氧化酶陰性
靛基質+、甲基紅+、V-P-
腸侵襲性大腸杆菌
賴氨酸脫羧酶-
動力試驗-（O124動力陽性或陰性）
血清學鑒定
假定試驗：挑取經生化試驗證實為大腸埃希菌的瓊脂培養物，用致病性大腸埃希氏菌、侵襲性大腸埃希氏菌和產腸毒素大腸埃希氏菌多價O 血清和出血性大腸埃希氏菌 O157 血清做玻片凝集試驗。當與某一種多價 O 血清凝集時，再與該多價血清所包含的單價O血清做試驗。如與某一單價 O 血清呈現強凝集反應，即為假定試驗陽性
證實試驗：製備 O 抗原懸液，稀釋至Mac Farland3 號比濁管相當的濃度。原效價為 1：160～1：320 的 O 血清，用 0.5%鹽水稀釋至 1：40。稀釋血清與抗原懸液在 10 mm×75 mm 試管內等量混合，做單管凝集試驗。混勻後放於50℃水浴箱內，經 16 h 後觀察結果。如出現凝集，可證實為該 O 抗原 。
