目標
-通過對O157:H7檢驗常規法、免疫磁珠捕獲方法、VIDAS、BAX方法的配對比較,對方法進行有效的評價,考察4種方法間是否存在差異,同時判斷VIDAS、BAX方法的可行性。
實驗設計
-樣品的選擇:生豬肉陷、生菜。
-樣品的染菌:將樣品充分混勻,稱取25g樣品,加入O157:H7標準菌株(ATCC43888)生理鹽水菌懸液,染菌樣品的各種濃度見表1。
-實驗操作:詳見標準協作組下發的SOP。
-結果判斷:常規法與免疫磁珠捕獲方法、VIDAS、BAX方法的配對比較檢驗,用統計學的方法Chi-square Test(X2檢驗)進行分析;儀器法與磁珠法進行兩兩配對檢驗,經χ2檢驗進行分析。儀器法與磁株法比較,假陽性率≤10%、假陰性率≤2%為可接受方法。
結果
表5 常規法與免疫磁珠捕獲方法、VIDAS、BAX方法的比較
從表5可以看出,常規法與免疫磁珠捕獲方法、VIDAS、BAX方法在染菌濃度5 cfu/g時,P值均大於0.05,無顯著性差異;染菌量在0.5 cfu/g的P值均小於0.05,表明常規法與免疫磁珠捕獲方法、VIDAS、BAX方法之間有顯著性差異;自然樣品,常規法與免疫磁珠捕獲方法、BAX方法比較,結果無顯著性差異(P>0.05),與VIDAS方法結果有顯著性差異(P<0.05);總體P值分別為0.049、0.0004、0.0023,均小於0.05,表明常規法與免疫磁珠捕獲方法、VIDAS、BAX方法之間有顯著性差異。
表6 磁珠法和VIDAS法檢出率比較
表7 免疫磁珠捕獲方法和BAX方法檢出檢出率比較
實驗結論
免疫磁珠捕獲方法和VIDAS、BAX兩兩配對檢驗分析, VIDAS方法和免疫磁珠捕獲方法結果無顯著性差異(P>0.05),VIDAS方法的假陽性率為7.8%,無假陰性;BAX方法和免疫磁珠捕獲方法結果無顯著性差異(P>0.05),BAX方法的假陽性率為3.3%,無假陰性。故可以吸收這兩種儀器篩選方法作為國標檢驗方法。
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