直接接種法即取規定量供試品分別接種至各含硫乙醇酸鹽流體培養基和改良馬丁培養基的容器中。除另有規定外，每個容器中培養基的用量應符合接種的供試品體積不得大於培養基體積的10%，同時，硫乙醇酸鹽流體培養基每管裝量不少於15ml，改良馬丁培養基每管裝量不少於10ml。培養基的用量和高度同方法驗證試驗。
混懸液等非澄清水溶液供試品 取規定量，接種至各管培養基中。
固體製劑供試品 取規定量直接接種至各管培養基中。或加入適宜的溶劑溶解，或按標簽說明複溶後，取規定量接種至各管培養基中。
有抑菌活性的供試品 取規定量，混合，加入適量的無菌中和劑或滅活劑，然後接種至各管培養基中。或直接接入含適量中和劑或滅活劑的各管培養基中。
非水溶性製劑供試品 取規定量，混合，加入適量的聚山梨酯80 或其它適宜的乳化劑及稀釋劑使其乳化，接種至各管培養基中。或直接接種至含聚山梨酯80 或其它適宜乳化劑的各管培養基中。
敷料供試品 取規定數量，以無菌操作拆開每個包裝，於不同部位剪取約100mg或1cm×3cm 的供試品，接種於足以浸沒供試品的適量培養基中。
腸線、縫合線等供試品 腸線、縫合線及其它一次性使用的醫用材料按規定量取最小包裝，無菌拆開包裝，接種於各管足以浸沒供試品的適量培養基中。
滅菌醫用器具供試品 取規定量，必要時應將其拆散或切成小碎段，接種於足以浸沒供試品的適量培養基中。
放射性藥品 取供試品1 瓶(支)，接種於裝量為7.5ml 的培養基中。每管接種量為0.2ml。
培養及觀察
上述含培養基的容器按規定的溫度培養14 天。培養期間應逐日觀察並記錄是否有菌生長。如在加入供試品後、或在培養過程中，培養基出現渾濁，培養14 天後，不能從外觀上判斷有無微生物生長，可取該培養液適量轉種至同種新鮮培養基中，細菌培養2 天、真菌培養3 天，觀察接種的同種新鮮培養基是否再出現渾濁；或取培養液塗片，染色，鏡檢，判斷是否有菌。
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