1.好氧菌的培養由於大多數撖生物都是好氧菌,且微生物隻能利用溶於水中的氧,所以,如何保證在培養液中有較髙的溶解氧濃度就顯得特別重要。
在常壓(20℃)達到平衡時,氧在水中的溶解度僅為6.2ml/L,這些氧隻能保證氧化8.3mg葡萄糖,僅相當培養基中常用葡萄糖濃度的1%。除葡萄糖外,培養基中的無機或有機養料一般都可保證微生物使用幾小時至幾天,因此,對好氧菌來說,生長的限製因子幾乎總是氧的供應,隻有將培養液裝成淺層時,氧才不至於成為限製因子,在進行液體培養時,一般可通過增加液體與氧的接觸麵積或提高氧分壓來提高溶氧速率,具體措施有:①淺層液體培養;②利用往複式或旋轉式搖對三角瓶培養物作振蕩培養;③在深層液體培養器的底部通入加壓空氣,並用氣體分布器使其以小氣泡形式均勻噴出;④對培養液進行機械攪拌,並在培養器的壁上設置阻擋裝置。
在實驗室進行好氧細菌培養的具體方法有以下幾類:
(1)試管液體培養裝液量可多可少。此法的通氣效果一般均不夠理想,僅適合培養兼性厭氧菌。
(2)三角瓶淺層培養在靜止狀態下,三角瓶內的通氣狀況與其中裝液量(表7-9〉和棉塞通氣程度對微生物的生長速度和生長量有很大的關係。此法一般也僅適宜培養兼性厭氧菌。
〔3〕搖瓶培養即將三角瓶內培養液用3層紗布包住瓶口,以取代一般的棉花塞,同時降低瓶內的裝液量,把它放到往複式或旋轉式搖床上作有節奏的振蕩,以達到摁高溶氧暈的目的,目前仍廣泛地用於菌種的篩選以及進行生理、生化和發酵等試驗中。
(4)台式發酵罐體積一般為幾升至幾十升,並有多種自動控製和記錄裝置。現成的商品種類很多,用作發酵研究十分方便。
2.厭氧菌的培養在實驗室中,用液體培養基培養厭氧茵時,一般采用加有有機還原劑〔如巰基乙酸、半胱氨酸,維生素C或庖肉等)或無機還原劑(鐵絲等)的深層液體培養基,並在其上封以凡士林石蠟層,以保證它們的氧化還原電位達到150mV-420 mV的範圍。如果能將其放厭氧罐或厭氧箱中培養,則效果將會更好。
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