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溶血試驗



錄入時間:2015-3-19 11:58:35 來源:青島betway必威西汉姆联生物

 

1.血平板溶血試驗

培養基:營養瓊脂,含有0.85%的氯化鈉和5%體積分數的去纖維蛋血或經草酸鹽處理過的血。馬血對鏈球菌很合適,但其他的微生物(例如葡萄球菌)則用其他的動物血〈例如羊、兔子、牛)要更好一些。營養瓊脂培養基熔化後,冷卻到50,無菌地加入已滅菌的血細胞溶液(10ml瓊脂加0.5ml)。用手旋轉或翻轉試管使其混合,倒入培養皿中。另外,也可以在培養皿中先加入〔5—10ml營養瓊脂,凝固後在營養瓊脂上再倒人5ml血瓊脂,形成薄層,凝固。

試驗方法:對於葡萄球菌,在平板上劃線接種,以得到單個菌落;如果是鏈球菌,以傾倒平板接種,也可以劃線接種。在最佳生長溫度培養2d

結果記錄:如菌落周圍有清晰的環帶出現,則表明有溶現象。鏈球菌的β-溶血素作用能產生邊緣清晰的環帶;α-溶血素作用產生的環帶呈灰綠色且邊緣很模糊。但要注意,α-溶血素和β-溶血素的特征對於鏈球菌和葡萄球菌完全不同。對於葡萄球菌,則α-溶血素能產生清晰的環帶,而β-溶血素則產生暗色的模糊環帶。但是,葡萄球菌中的α-溶血素有時卻被認為是β-溶血素。因此,為避免混淆,最好是對溶血素的類型加以描述,而不僅是統稱為溶血素。

2.加強溶血試驗CAMP

加強溶血試驗是用於檢測B族鏈球菌中的一些菌株和某些特定菌株產生的細胞外可擴散的多肽CAMP因子)。多肽與葡萄球菌中的β-溶血素可協同作用,使羊血瓊脂中兩種菌劃線培養的結合處產生加強的溶血作用。甚至非溶血的B族鏈球菌的CAMP測試也呈陽性。後來該方法被用來區分李斯特菌的不同菌種。

培養基:羊血(體積分數為5%)瓊脂。在檢測李斯特菌屬時,由於羊血中常攜帶有李斯特菌屬的抗血清,必須先用鹽水衝冼羊血的紅血球,然後再重新懸浮於滅菌的鹽水中。

試驗方法

1鏈球菌檢測將產生β-溶血的金黃色葡萄球菌培養液橫穿羊血瓊培養基平板劃一條線。在直線的一用待培養液垂直劃線,該線與金葡萄球菌培養液的劃線相距1-2mm37℃培養18-24h

2李斯特菌的檢測 將產生β-溶血的金色葡萄球培養液穿衝過的羊血瓊脂培養基板劃一條直線。用馬紅球培養液另一條平行線,兩線相距4cm左右用待測菌液於金葡萄球菌和馬紅球菌劃線,與金黃色葡萄球菌菌培養液和馬紅球菌培養液的線縣局1-2mm18-24h

 

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