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厭氧培養方法介紹



錄入時間:2015-3-4 10:06:36 來源:青島betway必威西汉姆联生物

 厭氧培養方法介紹

  常用的厭氧培養方法主要有二大類,包括化學厭氧培養方法和物理厭氧培養方法,他們分別通過化學和物理的方法來製造厭氧環境,從而有利於厭氧菌的生長繁殖。

(一)化學厭氧培養法

  常用為厭氧生物袋培養法:厭氧生物袋是一種特製不透氣的塑料袋,袋中裝有氣體發生管、催化劑小管(內放鈀粒)和氧化還原指示劑小管(美藍).接種好的平板放入袋中,排出袋中氣體,卷疊好袋口,用彈簧夾莢緊,然後折斷氣體發生小管中安瓿,使發生反應產生CO2H2 等,在催化劑鈀的作用下,H2+O2(袋中剩餘氧) H2O這更保證了無氧環境,經0.5h 再折斷指示劑管中美藍液安瓿(美藍在無氧環境中呈無色美白,在有氧環境中又可變成藍色的美藍),如指示劑不變藍,表示袋內已成無氧環境,此時即可放37℃孵育培養。厭氧產氣管成份;碳酸氫鈉、磞氫化鉀、5%檸檬酸溶液。厭氧指示管成份:0.002%美藍、10%堿性葡萄糖。催化反應管成份:鈀(A )

(二)物理厭氧培養方法

1、厭氧缸培養法

  厭氧缸是一個可密封的玻璃缸,頂端有一個抽氣口,使用方法如下:A.將接種厭氧菌的平板立即放入厭氧缸。B.在厭氧缸內放入冷催化劑鈀粒和美蘭指示劑安瓿。C.用真空泵抽去缸中的空氣,使缸內大氣壓降到10%毫米汞柱,然後充入氮氣,反複三次。最後充入80%氮氣,10%二氧化碳及10%氫氣。D.密閉厭氧缸。此時,缸99%的氧氣已被氮氣,二氧化碳及氫氣置換,殘餘的氧氣,在鈀粒催化下與氫氣作用生成水,缸壁會有水滴出現。缸內美蘭指示劑由淺蘭色轉變為無色,表示缸內氧氣已被驅除。E.放入37℃,培養48 小時後觀察結果。

2、厭氧箱培養法

  為專門培養厭氧菌的培養箱,現多為全自動控製,當將培養物放入培養箱,關上封閉門後,其自動啟動,通過多次抽掉空氣,灌入氮氣、二氧化碳及氫氣,最後形成厭氧環境。培養48 小時後即可取出培養物,觀察結果。

 

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