使培養液中微生物的生理狀態比較一致,生長發育處在同一階段的培養方法稱同步培養法。同步培養的方法很多,最常用的有選擇法和誘導法兩種。
(一)選擇法
選擇法是通過過濾、密度梯度離心、膜吸附和直接選擇等方法,從細胞群體中選擇處於同一生長發育階段的細胞來進行培養的方法。
1、離心沉降分離法 處於不同生長階段的細胞’其個體大小不同,通過離心就可在一定程度分開,然後用同樣大小的細胞進行培養便可獲得同步培養。
2過濾分離法 用孔徑不同的微孔濾膜可將大小不同的細胞分開,剛分裂的幼齡菌體較小,能通過濾孔,其餘菌體留在濾膜上麵,將濾液中的幼齡細胞進行培養,就可得到同步培養物。
3.硝酸纖維素薄膜法 先將菌液通過硝酸纖維素薄膜,由於細菌與濾膜帶有不同電荷,所以細菌能吸附於膜上,翻轉薄膜,再用新鮮培養液濾過培養,附著於膜上的細菌分離後的子細胞由於不與薄膜直接接觸,及菌體本身的重量,加之附著著培養物液的重量,便下落到收集器內,短時間內用收集內的細菌接種培養,便可得到同步培養物。
選擇法同步培養是在不影響曲體代謝下獲得的,因而菌體的生命活動較為正常,但也有其缺點,一些微生物即使個體大小相同時,其發育階段也可能不完全一致,這樣的微生物不宜采用這種方法。
(二)誘導法
誘導法主要是通過控製環境條件如溫度、營養物質等來誘導同步生長。
1.溫度調整法 將微生物的培養溫度控製在亞適溫度一段時間,使其緩慢地進行代謝,但又不進行分裂。然後將培養溫度提高到最適生長溫度,大多數細胞就會同步分裂。
2.營養條件調整法 控製營養物的濃度或組成以達到同步生長。限製碳源或其他營養物,使細胞隻能進行一次分裂而不能繼續生長,從而獲得剛分裂的細胞群體,然後再轉入適宜的培養基屮.它們便進入同步生長。
誘導法除上述兩種外還有其他方法,誘導法的缺點是會給細胞的正常代謝帶來一些不利影響。
材料
黑曲黴斜麵菌種.麥芽汁平板4個
方法與步驟
1.孢子懸液的製備 取數環孢子放入盛有50ml無菌水的三角瓶中(瓶內放玻璃珠若幹)
充分振蕩,製成孢子懸液,孢子量約105個/ml。
2.用鑷子取圓形無菌玻璃紙1張(與培養皿直徑大小相似),放在麥芽汁平板上。
3.取孢子懸液0.1ml放在上述平板上,用玻璃塗布器塗布均勻,置於冰箱(4℃)2h然後取出,放入30℃溫箱培養1h。同時設一對照,不經低溫處理直接放入30℃溫箱培養11h。
4.鏡檢 計算孢廠出芽率,並比較菌絲生長情況。
上一篇:高壓蒸汽滅菌和幹熱滅菌
下一篇:產芽孢細菌屬的鑒別