染色鏡檢
將上述可疑純培養物做革蘭氏染色並做濕片檢查; 利斯特菌為革蘭氏陽性短杆菌, 大小為0.4～0.5μm×0.5～2.0μm；用生理鹽水製成菌懸液, 在油鏡或相差顯微鏡下觀察, 該菌出現輕微旋轉或翻滾樣的運動。
該菌為革蘭氏陽性無芽孢杆菌，在純培養物中呈短小杆菌，在初齡培養物中呈球杆菌狀，在老齡培養物中呈長絲的長杆菌狀，有些細菌因此而變成革蘭氏陰性；為需氧或兼性厭氧菌，在20～25℃培養時能形成4根鞭毛，運動活潑；在37℃培養時無鞭毛，運動消失。
1.初篩
在我們前期工作中發現，高汙染樣品在選擇性瓊脂平板上可疑菌落較多，為避免漏檢和減少工作量，增加初篩步驟：挑取典型或可疑菌落接種在木糖、鼠李糖發酵管中，無須燒環同時TSA-YE平板上劃線分離純菌。
初篩及純培養
自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個以上典型或可疑菌落，分別接種在木糖、鼠李糖發酵管，於37℃培養24h；同時在胰酪腖大豆瓊脂培養基（TSA-YE）平板上劃線純化，於30℃培養24h-48h。木糖陰性為藍色，鼠李糖陽性為黃色，在TSA-YE平板上可疑菌落為淡藍色。
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