紫外線滅菌

                             紫外線滅菌
（一）目的要求
了解紫外線滅菌的原理和方法
（二）基本原理
紫外線滅菌是用紫外線燈進行的。波長為200~300nm的紫外線都有殺菌能力，其中以260nm的殺菌力最強。在波長一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強度和時間的乘積成正比。紫外線殺菌機理主要是因為它誘導了胸腺嘧啶二聚體的形成和DNA鏈的交聯，從而抑製了DNA的複製。另一方麵，由於輻射能使空氣中的氧電離成[O]，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成過氧化氫（H2O2）。O3和H2O2均有殺菌作用。紫外線穿透力不大，所以，隻適用於無菌室，接種箱，手術室內的空氣及物體表麵的滅菌。紫外線燈距照射物以不超過1.2m為宜。
此外，為了加強紫外線滅菌效果，在打開紫外燈以前；可在無菌室內(或接種箱內)噴灑3%～5%石炭酸溶液，一方麵使空氣中附著有微生物的塵埃降落，另一方麵也可以殺死一部分細菌。無菌室內的桌麵、凳子可用2%～3%的來蘇爾擦洗，然後再開紫外燈照射，即可增強殺菌效果，達到滅菌目的。
（三）器材
1．培養基 牛肉膏蛋白腖平板。
2．溶液或試劑 3%~5%石炭酸或2%~3%來蘇爾溶液。
3．儀器或其他用具 紫外線燈。
（四）操作步驟
l．單用紫外線照射
（1）在無菌室內或在接種箱內打開紫外線燈開關，照射30min，將開關關閉。
（2）將牛肉膏蛋白腖平板蓋打開15min，然後蓋上皿蓋。置37℃培養24h。共做三套。
   （3）檢查每個平板上生長的菌落數。如果不超過4個，說明滅菌效果良好，否則，需延長照射時間或同時加強其他措施。
    2．化學消毒劑與紫外線照射結合使用
（1）在無菌室內，先噴灑3%～5%的石炭酸溶液，再用紫外線燈照射15imn。 
（2）無菌室內的桌麵，凳子用2%～3%來蘇爾擦洗，再打開紫外線燈照射15min。
    （3）檢查滅菌效果[方法同“單用紫外線照射”(3)]。
    因紫外線對眼結膜及視神經有損傷作用，對皮膚有刺激作用，故不能直視紫外線燈光下工作。
（五）實驗報告
1．結果
記錄兩種滅菌效果於下表中
處理方法 平板菌落數
1   2   3 滅菌效果比較
紫外線照射
3%～5%石炭酸+紫外線照射    
2%～3%來蘇爾+紫外線照射    
 
2．思考題。
（1）細菌營養體細胞和細菌芽孢對紫外線和的抵抗力會一樣嗎，為什麽？
（2）你知道紫外線燈管是用什麽玻璃製作的？為什麽不用普通燈用玻璃？
（3）在紫外燈下觀察實驗結果時，為什麽要隔一塊普通玻璃？
 
   

 

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