雙歧杆菌培養液製備
挑取BBL瓊脂上純培養的雙歧杆菌接種於PYG液體培養基，同時用未接種菌的PYG液體培養基做空白對照，絕對厭氧，36±1℃ 培養48±2 h。
標準液配製
乙酸標準溶液：準確吸取乙酸5.70ml 加水稀釋至100.0ml，搖勻，附錄Ｂ方法進行標定，配成約1.0 mol/L的乙酸標準溶液。乙酸使用液：將經標定的乙酸標準溶液用水稀釋至20.0 mmol/L。
乳酸標準溶液：準確吸取含量為85-90%的乳酸0.84 ml，加水稀釋至100.0ml，搖勻，配成1.0 mol/L的乳酸標準溶液。乳酸使用液：將乳酸標準溶液用水稀釋至20.0 mmol/L。
乙酸的處理
取雙歧杆菌培養液2.0-3.0ml放入10ml離心管中，加入0.2ml 50％硫酸溶液，混勻，加入2.0ml丙酮，混勻後加過量氯化鈉，劇烈振搖1min，再加入2.0ml乙醚，振搖1min後，於3000r／min離心5min，將上清液轉入另一試管中，下層溶液用2.0ml丙酮和2.0ml乙醚重複提取2次，合並有機相，於40℃水浴中用氮氣吹至少量溶液存在，用丙酮定容至1.0 ml，混勻後備用。同樣操作步驟處理乙酸標準和空白培養液。
乳酸的處理
取雙歧杆菌培養液2.0-3.0ml放入10比色管中，100℃水浴10min，加入0.2mL 50%硫酸溶液，混勻，加入1.0mL甲醇，於58℃水浴30min後加水1.0mL，加三氯甲烷1.0mL，振搖3min，3000r/min離心5min，取三氯甲烷層分析。同樣操作步驟處理乳酸標準和空白培養液。
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