金黃色葡萄球菌及檢驗
一、生物學特性
典型的金黃色葡萄球菌為球型，直徑0.8μm左右，顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛，大多數無莢膜，革蘭氏染色陽性。金黃色葡萄球菌營養要求不高，在普通培養基上生長良好，需氧或兼性厭氧，最適生長溫度37°C，最適生長pH 7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。血平板菌落周圍形成透明的溶血環。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，可在10-15%NaCl肉湯中生長。可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產酸不產氣。甲基紅反應陽性，VP反應弱陽性。許多菌株可分解精氨酸，水解尿素，還原硝酸鹽，液化明膠。金黃色葡萄球菌具有較強的抵抗力，對磺胺類藥物敏感性低，但對青黴素、紅黴素等高度敏感。
二.流行病學
金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在，空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可找到。因而，食品受其汙染的機會很多。近年來，美國疾病控製中心報告，由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位，僅次於大腸杆菌。金黃色葡萄球菌腸毒素是個世界性衛生問題，在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒占整個細菌性食物中毒的33%，加拿大則更多，占45%，我國每年發生的此類中毒事件也非常多。金黃色葡萄球菌的流行病學一般有如下特點：
季節分布，多見於春夏季；中毒食品種類多，如奶、肉、蛋、魚及其製品。此外，剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報道。上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%，所以人畜化膿性感染部位常成為汙染源。一般說，金黃色葡萄球菌可通過以下途徑汙染食品：
食品加工人員、炊事員或銷售人員帶菌，造成食品汙染；食品在加工前本身帶菌，或在加工過程中受到了汙染，產生了腸毒素，引起食物中毒；熟食製品包裝不嚴，運輸過程受到汙染；奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時，對肉體其他部位的汙染。
腸毒素形成條件：
存放溫度，在37°C內，溫度越高，產毒時間越短；
存放地點，通風不良氧分壓低易形成腸毒素；
食物種類，含蛋白質豐富，水分多，同時含一定量澱粉的食物，腸毒素易生成。
三.致病性
金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌，可引起局部化膿感染，也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至敗血症、膿毒症等全身感染。金黃色葡萄球菌的致病力強弱主要取決於其產生的毒素和侵襲性酶：a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四種，能損傷血小板，破壞溶酶體，引起肌體局部缺血和壞死；b.殺白細胞素：可破壞人的白細胞和巨噬細胞；c.血漿凝固酶：當金黃色葡萄球菌侵入人體時，該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積於菌體表麵或凝固，阻礙吞噬細胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關；d.脫氧核糖核酸酶：金黃色葡萄球菌產生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫，可用來作為依據鑒定金黃色葡萄球菌；e.腸毒素：金黃色葡萄球菌能產生數種引起急性胃腸炎的蛋白質性腸毒素，分為A、B、C、D、E及F五種血清型。腸毒素可耐受100°C煮沸30分鍾而不被破壞。它引起的食物中毒症狀是嘔吐和腹瀉。此外，金黃色葡萄球菌還產生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
四.檢驗和控製
1．金黃色葡萄球菌的檢驗
樣品處理：無菌取25g或25mL食品樣品，放入225mL滅菌生理鹽水中均質，製成10-1稀釋液。
增菌培養：將10-1稀釋液接入7.5%NaCl肉湯或胰蛋白腖肉湯中，37°C培養24小時。
分離培養：將上述稀釋液或培養液分別劃線血平板和Baird-Parker平板，置37°C培養24-48小時。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃或白色菌落，大而凸起，表麵光滑，周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落為圓形，直徑2-3mm，顏色灰或黑色，周圍有一渾濁帶。
染色觀察：從平板上挑取可疑性菌落進行革蘭氏染色，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性，顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜，直徑0.5-1μm。
血漿凝固酶試驗：吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯24小時培養物充分混勻，置36±1°C培養，每隔半小時觀察一次，連續觀察6小時，出現凝固，即將小試管傾斜或倒置時，內容物不流動，判為陽性。同時做陰陽性對照。
耐熱核酸酶試驗：將24小時肉湯培養物沸水浴處理15min，用接種環劃線刺種於甲苯胺蘭-DNA平板，36±1°C培養24小時，在刺種線周圍出現淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。
2．金黃色葡萄球菌腸毒素檢測
金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動物試驗、血清學試驗、免疫熒光試驗及酶聯免疫吸附等方法，在此就不一一贅述。
3．金黃色葡萄球菌的控製主要包括：
1）防止金黃色葡萄球菌汙染食品
防止帶菌人群對各種食物的汙染：定期對生產加工人員進行健康檢查，患局部化膿性感染（如疥瘡、手指化膿等）、上呼吸道感染（如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等）的人員要暫時停止其工作或調換崗位。
防止金黃色葡萄球菌對奶及其製品的汙染：如牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房，不能擠用患化膿性乳腺炎的牛奶；奶擠出後，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、細菌繁殖。奶製品要以消毒牛奶為原料，注意低溫保存。
對肉製品加工廠，患局部化膿感染的禽、畜屍體應除去病變部位，經高溫或其他適當方式處理後進行加工生產。
2）防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成
應在低溫和通風良好的條件下貯藏食物，以防腸毒素形成；在氣溫高的春夏季，食物置冷藏或通風陰涼地方也不應超過6小時，並且食用前要徹底加熱。
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