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平板菌落計數法樣品稀釋



錄入時間:2014-11-20 11:48:54 來源:betway必威西汉姆联生物

固體和半固體樣品:稱取25g 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌均質杯內,5 000r/min~10 000r/min 均質1 min~2 min ,或放人盛有225 mL 稀釋液的無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打1 min~2 min ,製成1:10 的樣品勻液。

液體樣品:以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,製成1 :10 的樣品勻液。 6.1.3 用1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1: 10 樣品勻液1 mL ,沿管壁緩慢注於盛有9 mL 稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液麵),振搖試管或換用一支無菌吸管反複吹打使其混合均勻,製成1:100 的樣品勻液。

按上述操作程序,製備10 倍係列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用一次1 mL 無菌吸管或吸頭。

根據對樣品汙染狀況的估計,選擇2 個~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液), 在進行10 倍遞增稀釋時,每個稀釋度分別吸取1 mL 樣品勻液加人兩個無菌平皿內。同時分別取1 mL 稀釋液加人兩個無菌平皿作空白對照。

及時將15 mL~20 mL 冷卻至46 ℃ 的平板計數瓊脂培養基(可放置於46 ℃±1 ℃ 恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,並轉動平皿使其混合均勻。

 


 

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