固體和半固體樣品：稱取25g 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌均質杯內，5 000r/min~10 000r/min 均質1 min~2 min ，或放人盛有225 mL 稀釋液的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1 min~2 min ，製成1：10 的樣品勻液。
液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，製成1 ：10 的樣品勻液。 6.1.3 用1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1： 10 樣品勻液1 mL ，沿管壁緩慢注於盛有9 mL 稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液麵），振搖試管或換用一支無菌吸管反複吹打使其混合均勻，製成1：100 的樣品勻液。
按上述操作程序，製備10 倍係列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用一次1 mL 無菌吸管或吸頭。
根據對樣品汙染狀況的估計，選擇2 個~3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液）, 在進行10 倍遞增稀釋時，每個稀釋度分別吸取1 mL 樣品勻液加人兩個無菌平皿內。同時分別取1 mL 稀釋液加人兩個無菌平皿作空白對照。
及時將15 mL~20 mL 冷卻至46 ℃ 的平板計數瓊脂培養基（可放置於46 ℃±1 ℃ 恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，並轉動平皿使其混合均勻。
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