取增菌後或篩選試驗陽性的mEC+n肉湯,分別劃線或適當稀釋後取0.1mL塗布接種於CT-SMAC平板和改良CHROMagar O157顯色瓊脂平板上,於36±1℃培養18~24h,觀察菌落。必要時將混合菌落分純。在CT-SMAC平板上,發酵山梨醇的菌落為紅色;典型菌落為不發酵山梨醇的圓形、光滑、較小的無色菌落,中心呈現較暗的灰褐色,用接種針挑起時無拉絲現象。在改良CHROMagar O157顯色瓊脂平板上為圓形、較小的菌落,中心呈淡紫色-紫紅色,邊緣無色或淺灰色。
注意:
增菌後的肉湯在取樣前,應輕微搖晃混勻。
劃線時應多次往返,保證分離效果。
塗布時應適當稀釋。
注意區分典型菌落,必要十分純。大部分非O157 E.coli發酵山梨醇,仍有6%不發酵山梨醇,它們與摩根氏菌和哈夫尼亞菌一樣在TC-SMAC上表現為與O157相同的菌落特征。
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