菌液製備 銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、白色念珠菌若為瓊脂培養物，加入適量的0.9%無菌氯化鈉溶液將瓊脂表麵的培養物洗脫，並將菌懸液移至無菌試管內， 然後用 0.9%無菌氯化鈉溶液衝洗並製成每1ml 含菌數約為108cfu 的菌懸液；若為液體培養物，離心收集菌體，用0.9%無菌氯化鈉溶液衝洗並製成每1ml 含菌數約為108cfu 的菌懸液。取黑曲黴的新鮮培養物加入3～5ml 含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80 的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫，然後，用適宜方法吸出孢子懸液至無菌試管內，加入適量的含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80 的0.9%無菌氯化鈉溶液製成每1ml 含孢子數108cfu 的孢子懸液。測定1ml 菌懸液中所含的菌數。
菌液製備後若在室溫下放置，應在 2 小時內使用；若保存在2～8℃，可在24 小時內使用。黑曲黴的孢子懸液可保存在2～8℃，在1 周內使用。
供試品接種 抑菌效力可能受試驗用容器特征的影響，如容器的材質、形狀、體積及封口的方式等。因此，隻要供試品每個包裝容器的裝量足夠試驗用，同時容器便於按無菌操作技術接入試驗菌液、混合及取樣等，一般應將試驗菌直接接種於供試品原包裝容器中進行貯存。若因供試品的性狀或每個容器裝量等因素需將供試品轉移至無菌容器時，該容器的材質不得影響供試品的特性（如吸附作用），特別應注意不得影響供試品的pH，pH 對抑菌劑的活性影響很大，同時容器的口徑大小應便於供試品的轉移及混勻。
取包裝完整的供試品至少 5 份，直接接種試驗菌，或取適量供試品分別轉移至5 個適宜的無菌容器中（若試驗菌株數超過5 株，應增加相應的供試品份數），每一容器接種一種試驗菌， 1g 或1ml 供試品中接菌量為105～106cfu，接種菌液的體積不得超過供試品體積的1%,充分混合，使供試品中的試驗菌均勻分布，然後置20～25℃避光貯存。
存活菌數測定 根據產品類型，按規定的間隔時間，分別從上述每個容器中取供試品1ml(g)，測定每份供試品中所含的菌數，測定細菌用胰酪腖大豆瓊脂培養基，測定真菌用沙氏葡萄糖瓊脂培養基。存活菌數測定方法及方法適用性試驗照非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法行，菌液製備同培養基適用性檢查，方法適用性試驗試驗菌的回收率不得低於70%。
根據存活菌數測定結果，計算1ml(g)供試品各試驗菌所加的菌數及各間隔時間的菌數，並換算成lg 值，試驗結果按有效數字的修約規則進舍，保留小數點後1 位有效數字。
結果判斷 供試品抑菌效力評價標準中的“減少的lg 值”是指各間隔時間測定的菌數lg 值與1ml(g)供試品中接種的菌數lg 值的相差值。
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