微生物的分離、純化及培養技術
分離與純化:從混雜的微生物群體中獲得隻含某一種或某一株微生物的過程。
為什麽要進行純培養:平板上的單一菌落並不一定保證是一種菌。
常用的分離、純化方法:
單細胞挑取法
稀釋塗布平板法
稀釋混合平板法
平板劃線法
稀釋塗布平板法 :
原理:
步驟: 1、倒平板: 牛肉膏蛋白腖培養基,高氏I號培養基,查氏培養基冷卻至55-60℃時,混勻後倒平板,牛肉膏蛋白腖培養基倒4皿,高氏I號培養基和查氏培養基各倒3皿。
2、製備汙水稀釋液:10g土樣,加入90ml無菌水中,在三角瓶中振搖20min。取0.5ml 加入盛有4.5ml無菌水的試管中,以此類推,製成不同稀釋度。
3、塗布:將上述每種培養基平板底麵標記稀釋度,然後用無菌吸管從最後三種稀釋度,即10-4、10-5和10-6的試管中吸取0.1ml對號放入平板上,用玻棒塗布。
4、培養:高氏I號和查氏倒置培養於28℃培養箱中培養3-5days,牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基在37℃培養1-2days。
5、挑菌落:轉至斜麵,檢查是否一致,保存。
平板劃線法:
1、倒平板,標記培養基名稱,編號和實驗日期。
2、劃線方法
稀釋混合平板法 :
1、先加菌
2、倒平板時注意培養基溫度
3、混合均勻
微生物培養技術
1、斜麵接種
2、液體培養基接種
3、穿刺接種
4、將已接種的斜麵、半固體和液體培養 基放置培養箱中培養
5、將生長好的菌種用牛皮紙包好,置4℃冰箱中保存。
上一篇:微生物消毒滅菌法
下一篇:菌種保藏