抗原的準備
誌賀氏菌屬沒有動力，所以沒有鞭毛抗原。誌賀氏菌屬主要有菌體（O）抗原。菌體O 抗原又可分為型和群的特異性抗原。
一般采用1.2﹪～1.5%瓊脂培養物作為玻片凝集試驗用的抗原。
備注1：一些誌賀氏菌如果因為K 抗原的存在而不出現凝集反應時，可挑取菌苔於1 mL 生理鹽水做成濃菌液，100℃煮沸15 min～60 min 去除K 抗原後再檢查。備注2：D 群誌賀氏菌既可能是光滑型菌株也可能是粗糙型菌株，與其他誌賀氏菌群抗原不存在交叉反應。與腸杆菌科不同，宋內氏誌賀氏菌粗糙型菌株不一定會自凝。宋內氏誌賀氏菌沒有K 抗原。
凝集反應
在玻片上劃出2 個約1cm×2cm 的區域，挑取一環待測菌，各放1/2 環於玻片上的每一區域上部，在其中一個區域下部加1 滴抗血清，在另一區域下部加入1 滴生理鹽水，作為對照。再用無菌的接種環或針分別將兩個區域內的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1 min，並對著黑色背景進行觀察，如果抗血清中出現凝結成塊的顆粒，而且生理鹽水中沒有發生自凝現象，那麽凝集反應為陽性。如果生理鹽水中出現凝集，視作為自凝。這時，應挑取同一培養基上的其他菌落繼續進行試驗。
血清學分型（選做項目）
先用四種誌賀氏菌多價血清檢查，如果呈現凝集，則再用相應各群多價血清分別試驗。先用B 群福氏誌賀氏菌多價血清進行實驗，如呈現凝集，再用其群和型因子血清分別檢查如果B 群多價血清不凝集，則用D 群宋內氏誌賀氏菌血清進行實驗，如呈現凝集，則用其Ⅰ相和Ⅱ相血清檢查；如果B、D 群多價血清都不凝集，則用A 群痢疾誌賀氏菌多價血清及1～12 各型因子血清檢查，如果上述三種多價血清都不凝集，可用C 群鮑氏誌賀氏菌多價檢查，並進一步用1～18 各型因子血清檢查。
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