增菌
以無菌操作取檢樣25g（或25 mL），加入裝有滅菌225 mL 誌賀氏菌增菌肉
湯的均質杯，用旋轉刀片式均質器以8 000～10 000 r/min 均質；或加入裝有225mL 誌賀氏菌增菌肉湯的均質袋中，用拍擊式均質器連續均質1 min～2 min。液體樣品振蕩混勻即可。於41.5 ℃±1℃，16 h～20 h 厭氧培養。
分離
取增菌後的誌賀氏增菌液分別劃線接種於XLD 瓊脂平板和MAC 瓊脂平板或誌賀氏菌顯色培養基平板上，於36 ℃1 ℃培養20 h～24 h，觀察各個平板上
生長的菌落形態，誌賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征見表1。宋內氏誌賀氏菌的單個菌落直徑大於其它誌賀氏菌。若出現的菌落不典型或菌落較小不易觀察，則繼續培養至48 h 再進行觀察。
選擇性瓊脂平板 誌賀氏菌的菌落特征
MAC 瓊脂 無色至淺粉紅色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊。
XLD 瓊脂 粉紅色至無色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊。
誌賀氏菌顯色培養基 按照顯色培養基的說明進行判定。
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