1.根據食品衛生標準要求和對樣品汙染情況的估計，選擇2~3個稀釋度。加入樣品時要注意外來的汙染。
2.培養基傾注的溫度與厚度是實驗正確與否的關鍵。（傾注的溫度：一般45℃左右，溫度過高會造成已受損傷的菌細胞死亡。厚度：直徑9cm的平皿一般要求15～20mL培養基，若培養基太薄，在培養過程中可能因水分蒸發而影響細菌的生長）。
3.為防止細菌增殖及平板底部產生片狀菌落，在加入樣液後，應在20min內傾注培養基。檢樣與培養基混勻時，可先向一個方向旋轉，然後再向相反方向旋轉。旋轉中應防止混合物濺到皿邊的上方。
4.培養基凝固後，應盡快將平皿翻轉培養，保持瓊脂表麵幹燥，避免菌落蔓延生長，影響計數。
5.為控製汙染，在實驗過程中，應在工作台上打開一塊瓊脂平板，其暴露時間應與檢樣從製備、稀釋到加入平皿時所暴露的最長時間相當，然後與檢樣一同培養，以了解檢樣在操作過程中有無受到來自外界的汙染。
6.培養溫度:
每種不同樣品中的細菌都有一定的生理特性，培養時應用不同的營養條件及生理條件可能得出不同的結果，因而應根據檢測標準的要求選擇適當的培養溫度和培養時間。
食品：36±１℃， 48±2h。
飲用水：36±１℃， 48h。
水產品：30±１℃， 72±3h。 (36℃培養和30℃培養結果差別較大，同樣水產品48h結果和72h也有差別。)
7.對照試驗：
檢樣的稀釋液中往往帶有食品顆粒，在這種情況下，為避免與細菌菌落混淆，可作同一稀釋度檢樣對照，不經培養，置4℃環境放置，在計數時用於對照。
可選用TTC平板計數瓊脂做培養基。一般加入量0.5%～1.0%濃度的TTC，100mL培養基中加入1mL。
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