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生化鑒定培養基質控和反應原理



錄入時間:2014-9-18 11:48:37 來源:betway必威西汉姆联生物

細菌生化試驗原理

 

      各種細菌所具有的酶係統不盡相同,對營養基質的分解能力也不一樣,因而代謝產物或多或少地各有區別,可供鑒別細菌之用。用生化試驗的方法檢測細菌對各種基質的代謝作用及其代謝產物,從而鑒別細菌的種屬,稱之為細菌的生化反應。

 

糖發酵試驗

  微生物能在有氧或無氧條件下代謝各種糖或醇能力,從而進行各種細菌的鑒別。

靛基質(吲哚)試驗原理

 將被檢菌接種到蛋白腖培養基中,36±1℃培養18h-24h後,沿試管壁滴加數滴吲哚試劑於培養物液麵,觀察結果。出現紅色者為陽性,出現黃色

者為陰性。大腸杆菌能分解蛋白質中的色氨酸,產生靛基質(吲哚),靛基質與對二甲基氨基苯甲醛結合,形成玫瑰色靛基質(紅色化合物),為陽性結果。

賴氨酸脫酶試驗

   將被檢菌接種到賴氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照生化管中,於36±1℃培養18h-24h後,觀察結果。

賴氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照均變黃為陰性,賴氨酸脫羧酶肉湯變紫,氨基酸脫羧酶對照變黃為陽性。

大腸杆菌賴氨酸試驗為陰性,沙門氏菌為陽性。

細菌甲基紅(Methylred)試驗(該試驗簡稱MR試驗)  大腸杆菌等分解葡萄糖產生丙酮酸,丙酮酸再被分解,產生甲酸、乙酸、乳酸等,使培養基的pH降低到4.2以下,這時若加甲基紅指示劑呈現紅色。因甲基紅指示劑變色範圍是pH4.4(紅色)~pH6.2(黃色)。產氣杆菌,分解葡萄糖產生丙酮酸,但很快將丙酮酸脫羧,轉化成醇等物,則培養基的pH仍在6.2以上,故此時加入甲基紅指示劑,呈現黃色。

細菌VP試驗原理

細菌在葡萄糖代謝中生成丙酮酸,從丙酮酸開始、隨細菌種類不同而有多種分解途徑,有的使丙酮酸進一步分解,生成甲酸、乙酸、乳酸、二氫和氧化碳等最終產物,有的可使丙酮酸脫羧變為中性最終產物乙酰甲基醇。在堿性條件下,可被空氣中氧氣氧化為丁二酮、丁二酮與蛋白腖中精氨酸所含的胍基起作用,生成紅色化合物,即V-P試驗陽性。

試劑組成:A液:a-萘酚  B液:40%氫氧化鉀溶液

試驗時先加A液,再加B液,若加反可能會出現假陽性。

 

 

 

 

 


 

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