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培養基製備方法-2015藥典--控製菌檢查



錄入時間:2014-9-5 11:43:09 來源:betway必威西汉姆联生物

 

1.胰酪大豆腖液體培養基(TSB)、胰酪大豆腖瓊脂培養基(TSA)、沙氏葡萄

糖液體培養基(SDB) 照無菌檢查法(通則1101)製備。

2、沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)

照無菌檢查法(通則1101)製備。如使用含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂培養基,

應確認培養基中所加的抗生素量不影響檢品中黴菌和酵母菌的生長。

3、 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA

馬鈴薯(去皮) 200g           瓊脂 14.0g

葡萄糖 20.0g                純化水 1000mL

取馬鈴薯,切成小塊,加水1000mL,煮沸20-30min,用6-8 層紗布過濾,

取濾液補水至1000ml,調節pH 值使滅菌後在25℃的pH 值為5.6±0.2,加入瓊

,加熱溶化後, 再加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅菌。

4.玫瑰紅鈉瓊脂培養基培養基

5.0g         玫瑰紅鈉 0.0133g

葡萄糖 10.0g    瓊脂 14.0g

磷酸二氫鉀 1.0g 純化水 1000ml

硫酸鎂 0.5g

除葡萄糖、玫瑰紅鈉外,取上述成分,混合,微溫溶解,加入葡萄糖、玫瑰紅鈉,

搖勻,分裝,滅菌。

5、硫乙醇酸鹽流體培養基 照無菌檢查法(通則1101)製備

6、腸道菌增菌液體培養基

明膠胰酶水解物 10.0g      二水合磷酸氫二鈉 8.0g

牛膽鹽 20.0g              亮綠 15mg

葡萄糖 5.0g               純化水 1000mL

磷酸二氫鉀 2.0g

除葡萄糖、亮綠外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使加熱後在25

pH 值為7.2±0.2,加入葡萄糖、亮綠,加熱至100 30 分鍾,立即冷卻。

7、紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基

酵母浸出粉 3.0g       中性紅 30mg

明膠胰酶水解物 7.0g   結晶紫 2mg

脫氧膽酸鈉 1.5g       瓊脂 15.0g

葡萄糖 10.0g          純化水 1000mL

氯化鈉 5.0g

除葡萄糖、中性紅、結晶紫、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH

使加熱後在25℃的pH 值為7.4±0.2。加入葡萄糖、中性紅、結晶紫、瓊脂,加

熱煮沸(不能在高壓滅菌器中加熱)。

8、麥康凱液體培養基

明膠胰酶水解物 20.0g      溴甲酚紫 10mg

乳糖 10.0g                純化水 1000mL

牛膽鹽 5.0g

除乳糖、溴甲酚紫外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅菌後在

25℃的pH 值為7.3±0.2,加入乳糖、溴甲酚紫,分裝,滅菌。

9、麥康凱瓊脂培養基

明膠胰酶水解物 17.0g        中性紅 30.0mg

腖(肉或酪蛋白) 3.0g       結晶紫 1mg

乳糖 10.0g                  瓊脂 13.5g

脫氧膽酸鈉 1.5g             純化水 1000mL

氯化鈉 5.0g

除乳糖、中性紅、結晶紫、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH

值使滅菌後在25℃的pH 值為7.1±0.2,加入乳糖、中性紅、結晶紫、瓊脂,加

熱煮沸1 分鍾,並不斷振搖,分裝,滅菌。

10RV 沙門菌增菌液體培養基

大豆腖 4.5g       六水合氯化鎂 29.0g

氯化鈉 8.0g       孔雀綠 36mg

磷酸氫二鉀 0.4g   純化水 1000mL

磷酸二氫鉀 0.6g

除孔雀綠外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅菌後在25℃的

pH 值為5.2±0.2。加入孔雀綠,分裝,滅菌,滅菌溫度不能超過115℃。

11、木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基

酵母浸出粉 3.0g        氯化鈉 5.0g

L-賴氨酸 5.0g          硫代硫酸鈉 6.8g

木糖 3.5g              枸櫞酸鐵銨 0.8g

乳糖 7.5g              酚紅 80mg

蔗糖 7.5g              瓊脂 13.5g

脫氧膽酸鈉 2.5g 純化水 1000mL

除三種糖、酚紅、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使加熱

後在25℃的pH 值為7.4±0.2,加入三種糖、酚紅、瓊脂,加熱至沸騰,冷至50

傾注平皿(不能在高壓滅菌器中加熱)。

12.三糖鐵瓊脂培養基(TSI

20.0g             硫酸亞鐵 0.2g

牛肉浸出粉 5.0g      硫代硫酸鈉 0.2g

乳糖 10.0g           0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

蔗糖 10.0g           瓊脂 12.0g

葡萄糖 1.0g          純化水 1000ml

氯化鈉 5.0g

除三種糖、0.2%酚磺酞指示液、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解, 調

pH 值使滅菌後在25℃的pH 值為7.3±0.1,加入瓊脂,加熱溶化後,再加入

其餘各成分,搖勻,分裝,滅菌,製成高底層(23cm)短斜麵。

13、溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基

明膠胰酶水解物 20.0g     甘油 10mL

氯化鎂 1.4g              瓊脂 13.6g

硫酸鉀 10.0g             溴化十六烷基三甲銨 0.3g

純化水 1000mL

除瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 使滅菌後在25℃的pH

7.4±0.2,加入瓊脂,加熱煮沸1 分鍾,分裝,滅菌。

14、甘露醇鹽瓊脂培養基

胰酪腖 5.0g 氯化鈉 75.0g

動物組織胃蛋白酶水解物 5.0g  酚紅 25mg

牛肉浸出粉 1.0g             瓊脂 15.0g

D-甘露醇 10.0g              純化水 1000mL

除甘露醇、酚紅、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅

菌後在25℃的pH 值為7.4±0.2,加熱並振搖,加入甘露醇、酚紅、瓊脂,煮沸

1 分鍾,分裝,滅菌。

15、梭菌增菌培養基培養基

10.0g          鹽酸半胱氨酸 0.5g

牛肉浸出粉 10.0g  乙酸鈉 3.0g

酵母浸出粉 3.0g   氯化鈉 5.0g

可溶性澱粉 1.0g   瓊脂 0.5g

葡萄糖 5.0g       純化水 1000mL

除葡萄糖外,取上述成分,混合,加熱煮沸使溶解,並不斷攪拌。如需要,

調節pH 值使滅菌後在25℃的pH 值為6.8±0.2。加入葡萄糖,混勻,分裝,滅

菌。

16、哥倫比亞瓊脂培養基

胰酪腖 10.0g          玉米澱粉 1.0g

肉胃蛋白酶消化物 5.0g 氯化鈉 5.0g

心胰酶消化物 3.0g     瓊脂 10.015.0g(依凝固力)

酵母浸出粉 5.0g       純化水 1000mL

除瓊脂外,取上述成分,混合,加熱煮沸使溶解,並不斷攪拌。如需要,調

pH 值使滅菌後在25℃的pH 值為7.3±0.2,加入瓊脂,加熱溶化,分裝,滅

菌。如有必要,滅菌後,冷至4550℃加入相當於20mg 慶大黴素的無菌硫酸慶

大黴素,混勻,傾注平皿。

17. 念珠菌顯色培養基

10.2g      瓊脂 15g

氫罌素 0.5g   滅菌水 1000ml

色素 22.0g

除瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅菌後在25℃的pH

6.3±0.2。濾過,加入瓊脂,加熱煮沸,不斷攪拌至瓊脂完全溶解,傾注平

皿。

SDA培養基用於白色念珠菌控製菌檢查;哥倫畢業用於梭菌控製菌檢查;甘露醇氯化鈉瓊脂培養基用於金葡菌控製菌檢查;於溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基用於銅綠假單胞菌的控製菌檢查;木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基用於沙門氏菌控製菌檢查;麥康凱瓊脂培養基用於大腸埃希菌控製菌檢查;胰酪大豆腖液體用於稀釋;若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基用於耐膽鹽革蘭陰性菌的控製菌檢查。

 

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