液體培養基的定量測定方法
選擇質控菌株和參考培養基
目標菌:用少量目標菌的培養物(10-100CFU),接種測試肉湯和參考肉湯,混勻
非目標菌:用大量非目標菌培養物(大於1000CFU)接種測試肉湯和參考肉湯,混勻
在適宜條件下培養一定時間
從每一種肉湯中移取一定量的菌液(必要時可取原菌液的稀釋液)塗布於非選擇性瓊脂平板上
培養後,對目標菌和非目標菌分別進行計數,並根據不同的測試目的進行計算和解釋
液體培養基的定量測定方法
——評價:
目標菌的PR不應小於0.1(即測試培養基和參考培養基菌落總數的差別不超過一個數量級)
非目標菌的SF值至少應達到2液體培養基的半定量測定方法
混合菌的接種:在測試肉湯中接種10CFU-100CFU的目標菌和>1000CFU的非目標菌,混勻
非目標菌的接種:在測試肉湯中接種>1000CFU的非目標菌,混勻
在規定的時間和溫度下進行培養
用3mm接種環取一環混合菌培養液劃線接種到特定目標菌選擇性平板上,取一環非目標菌培養液劃線接種到非選擇性平板上
將兩種平板在規定條件下培養
結果判定:選擇性平板上有至少10個目標菌生長,表示測試肉湯的生長率良好;非選擇性平板上沒有菌生長或少於10個菌,則表示測試肉湯的選擇性良好
液體培養基的半定量測定方法
混合菌的接種:在測試肉湯中接種10CFU-100CFU的目標菌和>1000CFU的非目標菌,混勻
非目標菌的接種:在測試肉湯中接種>1000CFU的非目標菌,混勻
在規定的時間和溫度下進行培養
用3mm接種環取一環混合菌培養液劃線接種到特定目標菌選擇性平板上,取一環非目標菌培養液劃線接種到非選擇性平板上
將兩種平板在規定條件下培養
結果判定:選擇性平板上有至少10個目標菌生長,表示測試肉湯的生長率良好;非選擇性平板上沒有菌生長或少於10個菌,則表示測試肉湯的選擇性良好
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