1、劃線獲得單個菌落的方法。
劃不出單個菌落的原因：
（1） 平板上有過多的水分
（2） 劃線時接種環未經反複灼燒
（3） 多區劃線，三區或四區劃線
四區劃線方法
2、 塗布和傾注的區別：
塗布利於觀察，但由於塗布棒上會帶有少量的菌液，影響計數的準確性。
塗布更為準確，但不利於觀察菌落的狀態。
3、 培養基配製時應注意的問題
（1）滅菌溫度要嚴格控製，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養基溫度不應太高，過高會導致糖分焦化，影響質量。
（2）瓊脂培養基不能反複溶化。反複溶化會破壞培養基中的營養成分。
（3）培養基不能反複滅菌，反複滅菌也會導致營養成分的破壞。
（4）含瓊脂的培養基滅菌後，要搖勻。
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