增菌培養
第一步增菌培養:用UVM肉湯,30±2℃培養22±2h
第二步增菌培養:用Fraser肉湯,從UVM增菌肉湯中取0.1±0.02ml培養液加入10±0.5ml Fraser肉湯中, 35±2℃
培養24-48小時。
選擇性分離培養
取0.1ml 30±2℃培養22±2h UVM肉湯培養物,劃線接種到MOX平板上, 35±2℃培養24-48小時,檢查有無黑色菌落,並菌落外圍有黑色環。 Fraser肉湯培養26±2小時,出現明顯黑色,取0.1±0.02ml培養物接種到MOX平板上35±2℃至少培養24小時,若Fraser肉湯培養26±2小時,沒有出現明顯黑色,繼續培養至48±2小時,出現明顯黑色,取0.1±0.02ml培養物接種到MOX平板上35±2℃至少培養24小時。若培養48小時,仍沒有出現明顯黑色,並在XOA上沒有可疑菌落,則此樣品為單增李斯特氏菌陰性。
從XOA平板上挑取至少20個可疑菌落,接種到HL瓊脂平板上, 35±2℃培養18-26小時,在暗光線下檢查是否有小的β溶血環。如果有,挑取單菌落進行確證試驗。如果沒有,此樣品為單增李斯特氏菌陰性。
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