1、增菌培養 取供試液10ml(相當於供試品1g、ml、10cm2)直接或處理後接種至適量(不少於100ml)的沙氏葡萄糖肉湯培養基中,培養48~72小時。
2、分離培養 取上述培養物劃線接種於沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上,培養24~48小時(必要時延長至72小時)。
白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養基上生長的菌落呈乳白色偶見淡黃色,表麵光滑有濃酵母氣味,培養時間稍久則菌落增大,顏色變深、質地變硬或有皺摺。若平板上無菌落生長或生長的菌落與上述菌落形態特征不符,判供試品未檢出白色念珠菌。
2、如平板上生長的菌落與上述菌落形態特征相符或疑似,應挑選2~3個菌落分別接種至念珠菌顯色培養基平板上,培養24~48小時(必要時延長至72小時)。若平板上無綠色或翠綠色的菌落生長,判供試品未檢出白色念珠菌。
3、若平板上生長的菌落為綠色或翠綠色,挑取相符或疑似的菌落接種於1%吐溫80玉米瓊脂培養基上,培養24~48小時。取培養物進行染色,鏡檢及芽管試驗。
4、芽管試驗 挑取1%吐溫80玉米瓊脂培養基上的培養物,接種於加有一滴血清的載玻片上,蓋上蓋玻片,置濕潤的平皿內,置35~37℃、1~3h,置顯微鏡下觀察,可見到由孢子長出短小芽管。
5、若上述疑似菌為非革蘭陽性菌,顯微鏡未見厚膜孢子、假菌絲、芽管,判供試品未檢出白色念珠菌。
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