1.增菌培養基：國際上采用的為mEC+n、mTSB+n、 EHEC Enrichment Broth (EEB＝TSB)+CCV、BPW-VCC。通過比較，mEC與mTSB差異不大，且為我國“汙染物監測網”和“全國腸出血性大腸杆菌O157:H7感染性腹瀉”檢測中普遍使用。(2005年,國家食源性疾病監測網 食品中病原菌檢驗)
2.增菌培養溫度：國際方法中有3個培養溫度：NMKL為41.5±0.5℃ 、 USDA/BAM為35±2℃，其餘為37℃。實驗結果表明，在41.5±0.5℃時，溫度作為一個選擇性因子，能夠抑製雜菌叢的生長，但同時O157也部分地受到抑製。在36±1℃ 時，O157的相對量較多。
3.分離培養基：目前國際上采用的培養基有：SMAC、CT-SMAC、Rainbow agar等，本實驗分別使用了SMAC、CT-SMAC、CHROMagar、改良CHROMagar瓊脂平板，結果表明：改良CHROMagar > CHROMagar > CT-SMAC > SMAC。
4.平板分離方法的選用：
（1）常規方法：FDA、CCFRA方法均使用2塊平板，塗布：取0.1ml或適當稀釋後的增菌液0.1ml進行，劃線取滿環。通過實驗表明，選擇2塊平板， CT-SMAC和改良CHROMagar ，取增菌液0.1ml先塗布一半，再劃線一半，可以減少操作誤差，得到較好的分離效果。
（2）磁珠方法（IMS）：國際上使用磁珠量為20 μl ，選擇2塊平板， CT-SMAC和改良CHROMagar ，取磁珠懸液各50 μl，先塗布一半，再劃線一半，可以減少操作誤差，同樣得到較好的分離效果。
5. 血清學：使用O157、H7因子血清鑒別。但哈夫尼亞、變形、異常沙門菌、檸檬酸杆菌等與O157可能有交叉反應，需要用生化進一步鑒定。
6.生化項目：一般使用Indole、MUG等作為篩選試驗，API20E、VITEK GNI或GNI+作為鑒定試驗。本法使用TSI、MUG作為篩選，MUG可篩除E.coli、宋內氏、檸檬酸杆菌、腸杆菌、克雷伯氏菌、哈夫尼亞菌、粘質沙雷氏菌、耶耳森氏菌等。TSI可篩除沙門菌、誌賀氏菌、變形、部分普羅菲登氏菌、摩根氏菌等。 API20E、VITEK GNI或GNI+作為鑒定試驗。
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