溶血試驗
挑取純培養的單個可疑菌落接種於TSSB 瓊脂平板上，30 ℃±1 ℃培養24h±2 h。蠟樣芽胞杆菌菌落為淺灰色，不透明，似白色毛玻璃狀，有草綠色溶血環或完全溶血環。蘇雲金芽胞杆菌和蕈狀芽胞杆菌呈現弱的溶血現象，而多數炭疽芽胞杆菌為不溶血，巨大芽胞杆菌為不溶血。
溶菌酶耐性試驗
用接種環取純菌懸液一環，接種於溶菌酶肉湯中，36 ℃±1 ℃培養24 h。蠟樣芽胞杆菌在本培養基(含0.001 ％溶菌酶)中能生長。如出現陰性反應，應繼續培養24 h。巨大芽胞杆菌不生長。
根狀生長試驗
挑取單個可疑菌落按間隔0.5cm 左右距離劃平行直線於營養瓊脂平板上，30 ℃±1 ℃培養24 h±2 h。蕈狀芽胞杆菌形成根狀生長的特征。蠟樣芽胞杆菌菌株不具形成根狀生長的特征。
