大腸菌群
指在一群37℃、24h培養能發酵乳糖、產酸、產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽孢杆菌。
操作步驟
采樣應在無菌操作下進行。將蘸有無菌生理鹽水的無菌棉拭子在推子前部上下均勻各塗抹3次,或在使用的刀刃、剪刃的兩側各塗抹一次采樣。將采樣後的棉拭子剪去手接觸部分,放入10mL滅菌生理鹽水中,充分振搖,取5mL放入雙料乳糖膽鹽發酵管中,置36℃±1℃溫箱中培養24h,如乳糖膽鹽發酵管中不產氣,則可報告大腸菌群陰性,如有產酸、產氣者,則進行分離培養。
分離培養:將產酸、產氣的發酵管劃線接種在伊紅美藍瓊脂平板上,置37℃溫箱培養18~24h,觀察菌落形態,做革蘭染色和證實試驗。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色,具有金屬光澤。
證實試驗:挑取可以大腸杆菌菌落1~2個進行革蘭染色鏡檢,同時接種乳糖發酵管於36℃±1℃培養24h,觀察產氣情況。
結果報告
如乳糖管最終產酸、產氣、革蘭染色為陰性無芽孢杆菌,即可報告大腸菌群陽性
金黃色葡萄球菌測定
指在B-P培養基或血平板培養基上生長良好,分解甘露醇產酸、血漿凝固酶陽性的革蘭陽性葡萄狀球菌。
操作步驟
1):樣品 7.5 %氯化鈉肉湯37℃18~24h
B-P平板37℃培養18~24h
觀察結果 無可疑菌落 報告未檢出
有可疑菌落 分離培養
2)、分離培養及結果報告
特征菌落 革蘭氏染色鏡檢
甘露醇發酵試驗
革蘭氏染色陽性球菌 血漿凝固酶試驗 陽性 檢出
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