細菌總數測定
指被檢樣品經過采樣處理，在一定條件下培養後（含培養基成分、培養溫度、培養時間、pH值、需氧性質等），25cm2表麵上所含菌落的總數。本方法規定的培養條件下所得結果，隻包括一群在營養瓊脂上生長發育的嗜中溫性需氧菌落總數。
檢測細菌總數主要作為判定公用毛巾、床上臥具被汙染的程度的標誌，及清洗消毒效果的判定和評價提供依據。
操作步驟
1 采樣方法
1）隨機抽取清洗消毒後準備使用的毛巾、床上臥具。
2）用滅菌生理鹽水濕潤棉拭子，在毛巾、枕巾對折後兩麵的中央各25cm2（5cm×5cm）麵積範圍；床單、被單在上下兩部各25cm2範圍內有順序地來回塗抹，用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部分，將棉簽手接觸的部分，將棉拭子放入10mL生理鹽水內，4h內送檢。
2 檢驗方法
1）將放有棉拭子的吸管充分振搖。此液為1：10稀釋液。
2）以無菌操作，吸取2mL檢樣，分別注入到兩塊滅菌平皿內，每皿1mL。如汙染嚴重，可十倍遞增稀釋，即吸取1mL加到9mL滅菌生理鹽水中，混勻，此液為1：100稀釋液。每個稀釋度做兩塊平皿。
3）將已融化冷至45℃左右的營養瓊脂培養基傾入平皿，沒皿約15mL，並立即旋搖平皿。冷凝後放36℃±1℃培養箱培養48h。
菌落計數方法
作平皿菌落計數時，可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查以防遺漏，在記下各平皿的菌落計數後，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。若平皿中有連成片狀的菌落，該平皿不宜計數；若片狀菌不到平皿的一半，而其餘一半中菌落分布均勻，則可將此半個平皿菌落計數後乘2，代表全皿菌落數。
公用毛巾、床上臥具細菌總數按公式（1）計算：
m=k·n /2 ¨¨¨¨¨¨（1）
式中：m——細菌總數，cfu/25cm2
k——稀釋倍數；
n——平均菌落數。
菌落報告方式
GB/T 18204.2—2000中的第9章
大腸菌群
指一群在37℃、24h能發酵乳糖、產酸、產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽孢杆菌。
該菌主要來源於人畜糞便，故以此作為糞便汙染指標來評價公用毛巾、床上臥具的衛生質量。
操作步驟
紙片法：用滅菌生理鹽水濕潤5cm×5cm大腸菌群快速測定紙片兩張，分別粘貼在毛巾、床上臥具規定部位和麵積範圍內，約30s後取下，置於無菌塑料袋內。將已采樣的紙片置36℃±1℃培養箱內培養16~18h，觀察結果。
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