酸性罐藏食品的接種培養

B.3.1 每份樣品接種4管酸性肉湯和2管麥芽浸膏湯。每管接種1 mL（g）～2 mL（g）樣品(液體樣品為1 mL～2 mL，固體為1 g～2 g，兩者皆有時，應各取一半)。培養條件見表B.2。

表B.2 酸性罐藏食品（pH≤4.6）接種的酸性肉湯和麥芽浸膏湯

 

培養基	管數	培養溫度 （℃ ）	培養時間（h ）
酸性肉湯	2	55±1	48
酸性肉湯	2	30±1	96
麥芽浸膏湯	2	30±1	96

B.3.2 經過表B.2中規定的培養條件培養後，記錄每管有無微生物生長。如果沒有微生物生長，則記錄後棄去。

B.3.3 對有微生物生長的培養管，取培養後的內容物的直接塗片，革蘭氏染色鏡檢，記錄觀察到的微生物。

B.3.4 如果在30 ℃培養條件下在酸性肉湯或麥芽浸膏湯中有微生物生長，將各陽性管分別接種2塊營養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板，一塊作需氧培養，另一塊作厭氧培養。

B.3.5 如果在55 ℃培養條件下，酸性肉湯中有微生物生長，將各陽性管分別接種2塊營養瓊脂平板，一塊作需氧培養，另一塊作厭氧培養。對有微生物生長的平板進行染色塗片鏡檢，並報告鏡檢所見微生物型別。培養程序見圖B.2。

B.3.6 挑取30 ℃需氧培養的營養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中的單個菌落，接種營養瓊脂小斜麵，用於後續的革蘭氏染色鏡檢。同時接種酸性肉湯或麥芽浸膏湯進行純培養。

挑取30 ℃厭氧培養的營養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中的單個菌落，接種酸性肉湯或麥芽浸膏湯進行純培養。

挑取55 ℃需氧培養的營養瓊脂平板中的單個菌落，接種營養瓊脂小斜麵，用於後續的革蘭氏染色鏡檢。同時接種酸性肉湯進行純培養。

挑取55 ℃厭氧培養的營養瓊脂平板中的單個菌落，接種酸性肉湯進行純培養。

B.3.7 挑取營養瓊脂小斜麵中的培養物塗片鏡檢。挑取30 ℃厭氧培養的酸性肉湯或麥芽浸膏湯培養物和55 ℃厭氧培養的酸性肉湯培養物塗片鏡檢。

B.3.8 將30 ℃需氧培養的純培養物接種於營養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中進行厭氧培養，將30 ℃厭氧培養的純培養物接種於營養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中進行需氧培養，將55 ℃需氧培養的純培養物接種於營養瓊脂中進行厭氧培養，將55 ℃厭氧培養的純培養物接種於營養瓊脂中進行需氧培養，以鑒別是否為兼性厭氧菌。

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