操作步驟
全脂奶檢測中，在用亞甲基藍、改良的Newman染色劑或Charlett染色劑對樣品著色前，對牛奶塗片進行脫脂十分必要。使用Ne_an染色劑，幹 燥的塗片需著色10mm,之後烘幹，在水中清冼，之後再烘T;使用Charlett染色劑，幹燥 的塗片僅需著色10~30s，載玻片在清洗之前不必烘幹，上述兩種染色劑中均包栝作為 細胞染色劑的亞甲基藍。
兩種配方中都有用作脫脂劑的1，1，2，2_四氯乙烷，也可用毒性較小的1，1，1_三氯 乙烷代替此試劑。操作時應使用通風櫥，以免吸人有害蒸氣。
體細胞和微生物染色後呈藍色，但在ChaHett染色劑中，堿性品紅使得牛奶蛋白呈現 粉紅色背景。使水平熱平板或扇形幹燥器進行幹燥。
Whiteside黏度試驗這是診斷乳腺炎的一種簡單、快捷、間接的測試方法,也是 一種估計牛奶中細胞數量的間接方法。在患乳腺炎牛的奶中，當細胞數量很大吋，用堿滴 定奶液,細胞中釋放出的核酸能產生明顯的黏度.
操作步驟
將1份lmol/L NaOH與5份奶或乳房分泌液在玻璃盤或碟中混合,用玻璃棒攪拌約15S
記錄黏滯性產生的情況。隨細胞數裏的增加黏滯性增強，若無黏滯性增強，則記錄為 陰性，表明牛奶正常。
培養檢測法引發乳腺炎的微生物分離通常是用劃線或倒平板技術從單個1/4 樣品中得到的，所用的培養基應適合大部分乳腺炎微生物的生長，必要用選擇性培養基分 離特殊菌種。最好的非選擇件培養基是5%血瓊脂,但這種培養基在使用時 會產生溶血 *
Edward七葉苷結晶紫血瓊脂培養基是一種選擇性培養 基，能用於乳腺炎鏈球菌的分離。選擇性試劑為結晶紫，其使用濃度為1:500000鏈球 菌可在該培養基上生長，而葡萄球菌等則受到抑製。乳腺炎鏈球等發酵七葉苷的微生物 能產生黑色菡落，而不發酵七葉駐的微生物（如無乳鏈球菌和停乳鏈球菌）則產生無色 菌落。
化膿性鏈球菌的另一種選擇性培養基是磷脂酰乙醇胺黏菌素1，2，3，4 -萘四酮酸血 瓊脂培養基(COBA) 1,2,3,4-萘四酮酸嶽一種與萘啶酮酸相似的抗菌成 分，能抑製革蘭氏陰性菌和葡萄球菌。
分離步驟
用4mm接種環將O.OlmL奶劃線於預先準備好的幹燥[flL瓊脂平板表麵，當檢驗取白 同一個奶牛的4個1/4樣品時，在同—平板的不同K域劃線。37℃培養48h，在24~48h 進行檢測。因接種時使用的是固定的數鱟，因而可與單個1/4樣品進行比較，記錄所有的 溶血菌落。
分離平板上生長的大部分菌落為可疑菌：記錄具有代表性菌落的形狀、大小、溶血 (如果冇）、著色、革蘭氏反應和形態，這樺觀察結果能確定菌株的種類，但必要時還需做進 一步的測試。此時對可疑的葡萄球菌進行載玻片凝固酶測試非常方便。陽 性反應表明存在金黃色葡萄球。可疑鏈球菌需進行生理試驗，也可用沉澱素試驗分離尖地鏈球菌。
如果檢測出引發乳腺炎的致病菌，表明動物可能發生了臨床或亞臨床的乳腺炎，這時 需進一步檢測該致病菌對抗生素的敏感性。 -
藥敏試驗
抗生素的選擇對乳腺炎的治療非常重要。從患病乳牛的牛乳中分離的致病菌純菌株可用於藥敏試驗。
將分離的致病菌接種到適當的肉湯培養基（營養肉湯或酵母膏葡萄糖Icmco肉湯） 中，37℃培養24h將O.lmL培養物接種於預先鋪好並幹燥的瓊脂平板上（葡萄球菌對 用營養瓊脂，鏈球菌可用酵母膏葡萄糖肉汁瓊脂），用無菌棒塗布平板，放至微幹，用紙片
笫二部分特殊食品的微生物檢測
分放器在瓊脂表麵放置一係列適當的抗生素紙片（也可使用經火焰灼燒過的無菌鑷子）。 從製造商處可買到紙片和紙片分放器
37℃培養24h，記錄紙片周圍的抑菌圈直徑。抑菌圈的大小表明菌株對特定抗生素 的敏感程度對於乳腺炎的治疔十分重要。但應注意:紙片周邊出現較大抑菌圏的抗生 素，其療效並不一定比產生小抑菌圏的抗生素療效好.因為很多因素會影響抑菌圈的大小 (Cooper,1955Linton, 1961),這種方法通過抗生素的抑菌圏檢測其最小抑製濃度，一個 簡單方法是Difco公司的E-測試法，這種方法使用了一種可放置在已接種平板上的抗生 素梯度條。
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