該技術使用的抗體與酶有共價的關聯。選擇使用那些經催化反應町以釋放出發色團或熒光團的酶。傳統的ELISA法使用有孔的微量滴定板，板上塗有用抗體處理過的吸附材料。這種已經免疫處理的抗體能捕獲特殊的抗原。
在直接的ELISA技術中，抗原容易被誘捕，因此可以用它來檢測食品稀釋液或增菌肉湯中的目標微生物或目標毒素。將未結合的物質從孔中仔細洗掉，加入結合有酶的抗 體。這些結合物依次被抗原吸收。再次將末被吸收的物質洗掉後，添加酶作底物。由於 酶的活性而使發色團或熒光團釋放顏色，顏色的強度弓抗原的數量成正比。該技術在方法學中被稱為非競爭雙抗體三明治技術。
根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法 ：雙抗體夾心法；雙抗體夾心法；間接法測抗體；競爭法；捕獲法測IgM抗體；應用親和素和生物素的ELISA；
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