黴菌的鑒定步驟
錄入時間:2013-11-8 10:00:42
來源:betway必威西汉姆联生物
1、分離、純化菌種: 應用分離培養基和純種移植法,在相應的培養基上培養出單純菌株。
2、培養特性的觀察:按照培養時間、生長速度、菌落質地、顏色、形態、氣味、培養基表麵變化、孢子及菌絲的顏色、結構、大小進行觀察並記錄。 3、顯微特征的觀察 (1)製片鏡檢:
在潔淨的載玻片上加一滴乳酸-苯酚液,用經過火焰滅菌的接種鉤從菌落的邊緣挑取少許幼嫩的菌體,置於乳酸-苯酚溶液中,然後加蓋玻片,注意不要產生氣泡,此為臨時性的載片標本;若需保存較長時間,可在蓋玻片周圍用加拿大樹膠封牢,貼上標簽,做成半永久性標本。 (2)活體觀察
活體觀察有小培養、大培養和黴變糧粒的顯微觀察3種方法。
①小培養(載玻片培養):在無菌條件下,滴一滴無菌的培養基於幹淨的載玻片上,接種後蓋上蓋玻片,放人已滅菌的培養皿中,用滅菌的濕棉球或紗布保持濕度,蓋好皿蓋置培養箱中進行培養,可以隨時用顯微鏡觀察其生長和發育情況。
②大培養(培養皿培養):即將培養有黴菌菌落的培養皿除去皿蓋置於顯微鏡的載物台上,用低倍鏡觀察黴菌的生長情況,可以看到其營養菌絲、子實體及孢子等。
觀察時必須注意:勿讓鏡頭接觸黴菌而汙染;觀察人員不能麵對標本,防止孢子飛散吸人體內,影響健康;觀察完畢立即加蓋,防止汙染標本。 ③黴變糧粒觀察:取發黴的糧食顆粒,放在載玻片上,然後用低倍鏡觀察發黴糧粒上的黴菌生長狀態和個體形態。
④進行活體觀察時,如果倒置顯微鏡就更方便、更便於觀察;如果遇到比較好的菌種標準或視野,也可以用照相機拍下來,苡便長期保存。
4、查對資料、鑒定菌種:根據培養特征、顯微特征觀察和記錄的結果,查對菌屬檢索表和有關的技術資料,依據菌種的培養性狀和個體形態,即可鑒定出黴菌的屬、群、係或種。
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