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微生物技術資料
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卵磷脂酶試驗



錄入時間:2013-10-16 10:17:42 來源:betway必威西汉姆联生物

1、原理:某些微生物能產生卵磷脂酶,在鈣離子存在時,能迅速分解卵磷脂,生成不溶性甘油酯和水溶性磷酸膽堿,在卵黃瓊脂平板上菌落周圍形成不透明的乳濁環或混濁白環,或使血清、卵黃液變混濁,以此鑒別細菌。 2、試驗方法: (1)卵黃平板法  A法:將待檢菌培養物劃線接種或點種於卵黃瓊脂平板上,36±1 ℃培養3~ 6h,觀察結果。 B 法: 
先用卵黃磷脂酶抗血清將平板塗一半,置於36 ℃待幹後,將待檢菌接種於未塗抗血清的一半卵黃瓊脂平板上,再轉劃已塗過抗血清的一半,36±1 ℃厭氧培養24~ 48h,觀察結果。 
在未塗抗血清的一半平板上,菌落周圍形成較大的不透明乳白色混濁區,在塗抗血清的一半平板上,菌落周圍無不透明混濁區,為陽性。 兩邊均無不透明區,為陰性。 
乳糖卵黃瓊脂平板,借以確定該菌可否產生卵磷脂酶。 卵磷脂酶具抗原性,其活性可被相應抗血清所抑製, (2)卵黃鹽水法: 
 將庖肉培養基培養物經除菌過濾,收集濾液。在兩支滅菌試管內,每管加入1%卵黃鹽水0.4mL,在一管中加入濾液0.2mL,另一管加入生理鹽水0.2mL作對照。在36 ℃ 水浴中,經2h、 4h、 8h、 24h觀察結果。  管底發生混濁沉澱,對照管無沉澱者,為陽性。 3、結果觀察與記錄: 
 菌落周圍形成較大的不透明區,為陽性。  兩邊均無不透明區,為陰性。 
 管底發生混濁沉澱,對照管無沉澱者,為陽性。  兩管無沉澱者,為陰性。

 

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