滅菌後小倒管內留有氣泡原因及解決辦法

大腸菌群、大腸杆菌檢測時，所用培養基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管（杜氏管）考察產氣的培養基，滅菌後，偶爾會有小氣泡留在小倒管內，導致培養基不能使用。重複滅菌不僅費時，更重要的是會破壞培養基的有效成分。為了避免這類問題的發生，我公司實驗室根據實驗經驗，做出以下幾種可能原因分析：

高壓鍋在滅菌過程中產生的最大壓力不夠，不能將小倒管內的氣體擠出，導致滅菌後任留有小氣泡。此外，高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度，也會出現類似現象。

解決辦法：使用檢查滅菌效果的用品－壓力蒸汽滅菌指示卡，對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進行監測。

在滅菌時，試管塞塞得太緊（有些矽膠塞與試管不配套）會導致試管內壓力與滅菌鍋內壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時，鍋內壓力會大於試管內壓力，試管內壓力不夠，不能將小倒管內氣體排盡，就留有氣泡；當滅菌鍋降溫降壓時，鍋內壓力小於管內壓力，可能會使試管塞和培養基崩出，培養基報廢。

解決辦法：改用塑料帽、不鏽鋼管帽，或者與試管相匹配的矽膠塞。

小倒管在加熱加壓後，一方麵液體培養基要進入小倒管，另一方麵小倒管內部的空氣要被排出，如果小倒管管口太小，液體不容易進去，裏麵的空氣不容易被排出，就會導致有小氣泡生成。

解決辦法：改用開口比較大的倒管。
 

1.可以在高壓鍋壓力降下來後，溫度不太高的時候將培養基從鍋中拿出，迅速放在冷水中，急冷，注意要使冷水高度超過試管中液麵高度。利用熱脹冷縮的原理，可以使小倒管中氣泡排出。

2.若使用非全自動高溫高壓滅菌鍋（此類鍋一般需要在100℃手動關閉放氣閥），則不要在鍋剛達到100℃時就關閉放氣閥，可以讓高壓鍋在100℃時多排一會兒熱氣，這樣有助於小倒管中氣體排出。

此外，盡量不要采用將滅菌後的試管顛倒或大角度傾斜的方式，使小倒管內氣體排出。此種方法可能會導致培養基通過試管口或試管塞受到汙染，或者導致試管內液體流出。