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FDA BAM菌落總數測定



錄入時間:2008-9-26 10:28:48 來源:青島betway必威西汉姆联

            
一、菌落總數定義:
   菌落總數是指在被檢樣品的單位重量(g)、容積(ml)或表麵積(cm2)內,所含能於某種固體培養基上,在一定條件下培養後所生成的菌落的總數。
二、FDA BAM 菌落總數測定流程:
    檢樣xg/mL+9xml稀釋液(磷酸鹽緩衝液), 適當十倍稀釋樣品,選擇2~3個連續適宜稀釋度,各取1mL分別加入滅菌平皿內(每個稀釋度做兩個平行),每皿內加入適量平板計數瓊脂(PCA),35 ℃ ,48 ± 2h,菌落計數 。
    選擇25~250CFU之間的菌落進行計數,計算公式如下:
     N=∑C/(1*n1+0.1*n2)*d
所有平板的菌落數都不足25CFU,報告EAPC/ml(g)為<25*1/d。
     EAPC:estimated aerobic plate count
所有平板的菌落數都超過250CFU,但不足100/cm2 ,報告EAPC/ml(g)為最接近250CFU的平板菌落數的估計值,乘以相應的稀釋度。
所有平板的菌落數都超過100/cm2 ,計算平板的麵積(直徑為90mm的平板麵積為65cm2),估計最高稀釋度每cm2的菌落數,乘以相應平板麵積作為該稀釋度的菌落計數結果,報告EAPC/ml(g)為>65*100* 1/d。
無法計數的平板報告LA(Laboratory Accident)。
最終結果保留前兩位有效數字。按照4舍6入,5是奇進偶不進。

三、菌落總數測定幾點要求
每個樣品從開始稀釋到傾注最後一個平皿所用的時間不得超過15min,主要為防止細菌增殖和產生片狀菌落。樣液與瓊脂應充分混合,避免將混合物濺到平皿壁和皿蓋上。皿內瓊脂凝固後,不要長時間放置,然後倒置培養,可避免菌落蔓延生長。
檢樣過程中應用稀釋劑做空白對照,用以判定稀釋液、培養基、平皿或吸管可能存在的汙染。同時,檢樣過程中應在工作台上打開一塊空白平板計數瓊脂,其暴露時間應與檢樣時間相當,以了解檢樣在檢驗操作過程中有無受到來自空氣的汙染。
檢樣稀釋液有時帶有食品顆粒,為避免與細菌菌落發生混淆,可作一檢樣稀釋液與平板計數瓊脂混合的平皿,不經培養,於4 ℃放置,以便在計數檢樣時用作對照。



   
   
   

 

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