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支原體實驗室檢測方法



錄入時間:2008-9-25 9:43:15 來源:青島betway必威西汉姆联

   
   支原體實驗室檢測方法有:形態學檢查、支原體培養、抗原檢測、血清學方法和分子生物學方法。 
   解脲支原體MB抗原的研究表明:MB抗原是解脲支原體感染時被識別的主要外膜抗原,具有種特異性,包含血清特異的和交叉反應的抗原決定簇。編碼MB抗原的基因長1200多個堿基、N端1/3為保守區,包含群特異的抗原決定簇:C端2/3是由重複序列組成的可變區,包含型特異的抗原決定簇,對該抗原的研究及對於研究疾病的發病機製和免疫機製起重要作用。MB抗原位於解脲支原體膜的表麵,N端固定於膜上使C端重複區暴露於微生物周圍的微環境。N端可以作為其分群分型的基礎,C端最可能首先與宿主的防禦係統相遇而引起主要的抗體反應,是理解它的發病機製和免疫機製的基礎。MB抗原與疾病的關係,以及它在疾病中的作用還有待進一步探討。 
   測定支原體抗體的血清學試驗方法中,有支原體特異性血清學檢測和非特異性血清學檢測。支原體特異性血清學檢測方法中,最常用的是補體結合試驗,另有間接免疫熒光染色檢查法、生長抑製試驗、代謝抑製試驗、間接血凝試驗、酶免疫法和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等。
   支原體的非特異血清學方法有肺炎支原體冷凝集試驗與MG鏈球菌凝集試驗,對支原體肺炎能起輔助診斷的作用。檢測特異性抗體IgG的方法尚不能達到早期快速診斷的目的,抗原的檢測為今後研究的發展方向。目前已有用酶聯免疫吸附試驗、熒光標記抗體、肺炎支原體膜蛋白單克隆抗體和反向間接血凝法直接檢測分泌物和體液中支原體抗原的報道,具有很高的特異度和靈敏度。人體感染肺炎支原體後,能產生特異性IgM和IgG類抗體。IgM類抗體出現早,一般在感染後1周出現,3~4周達高峰,以後逐漸降低。由於肺炎支原體感染的潛伏期為2~3周,當患者出現症狀而就診時,IgM抗體已達到相當高的水平,因此IgM抗體陽性可作為急性期感染的診斷指標。如IgM抗體陰性,則不能否定肺炎支原體感染, 需檢測IgG抗體。IgG較IgM出現晚,需動態觀察,如顯著升高提示近期感染,顯著降低說明處於感染後期。由此提示IgG與IgM同時測定,可提高診斷率,達到指導用藥、提高療效之目的。Savyon公司提供支原體IgM、IgG和IgA抗體ELISA檢測試劑盒。 
   支原體分子生物學檢測方法有基因探針和聚合酶鏈反應(PCR)等方法。基因探針的核酸雜交法,雖然敏感性和特異性都很高,但基因探針常用同位素標記,放射性危害大,設備要求高且繁瑣難以推廣,近年來發展的PCR技術,使得支原體檢測變得簡便、快速、敏感、特異。 
tu1血清標本中的MP抗體與板上包被的MP抗原結合 
tu2抗人IgG/IgM/IgA-HRP和板上的抗原抗體複合物結合 
tu3加入的底物被酶分解的產物的顏色深度與標本中抗體的濃度成正比 
SeroMP支原體ELISA試劑盒 是檢測支原體肺炎的第三代產品,它是通過ELISA法在酶標板上完成人血清的IgM、IgG和IgA抗體檢測。沙眼衣原體感染的診斷方法有細胞培養、直接抗原檢測、分子生物學和血清學方法。直接抗原檢測法中獲取標本(在感染部位取材)較困難,所得結果可靠性也不強。而本試劑盒采用的血清學檢測以血清為標本,可檢測各個部位和各個時期的肺炎衣原體感染,並且某一類型的抗體象征疾病處於一定發展階段。 

 

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