核酸探針在快速檢測食品中致病菌的研究現狀
原理:將己知核苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法標記,加入己變性的被檢DNA樣品中,在一定條件下即可與該樣品中有同源序列的DNA區段形成雜交雙鏈,從而達到鑒定樣品中DNA的目的。
核酸探針:能認識到特異性核苷酸序列,且有標記的單鏈DNA分子。
核酸探針的應用主要的範圍:
(1)用於檢測無法培養,不能用作生化鑒定、不可觀察的微生物產物以及缺乏診斷抗原等情況,如腸毒素基因。
(3)檢測細菌內抗藥基因。
(4)分析食品是否會被某些耐藥菌株汙染,判定食品汙染的特性。
(5)細菌分型,包括rRNA分型。
核酸探針檢測技術的最大優點是:
(1)特異性;
(2)敏感性。
存在的問題:
檢測一種菌就需要製備一種探針;要達到檢測量還要對樣品進行一定時問的培養;探針檢測是分析基因序列,對毒素汙染的食品有時因樣品中不含產毒菌而無法檢測。
製備核酸探針雜交技術:
(1)夾心雜交法
(2)核酸置換雜交分析法
(3)浸染棒法