一、細菌的傳播與致病
諾卡菌屬細胞壁含分枝菌酸,是廣泛分布於土壤中的需氧性放線菌。多數為腐物寄生性的非病原,不屬於人體正常菌群,故不呈內源性感染。分為星形諾卡菌、短鏈諾卡菌、鼻疽諾卡菌、肉色諾卡菌、巴西諾卡菌、越橘諾卡菌、豚鼠耳炎諾卡菌、南非諾卡菌、苦味諾卡菌等9種。對人致病的主要有3種:星形諾卡菌(N. asteroides )、豚鼠諾卡菌(N.caviae)和巴西諾卡菌N.brasiliensis )。引起人類疾病主要為星形諾卡菌和巴西諾卡菌。在我國最常見的為星形諾苄菌。
奴卡菌病多為外源性感染,可因吸入肺部或侵入創口引起化膿感染。如星形諾卡菌主要通過呼吸道進入人體引起人的原發性、化膿性肺部感染,可出現肺結核的症狀如咳嗽,發熱,寒戰,胸痛,衰弱,納差和體重減輕,但這些症狀都是非特異性的,並且與肺結核或化膿性肺炎相似。胸腔積液也可發生。約1/3病例可發生轉移性腦膿腫,通常可有嚴重頭痛和局灶性神經係統異常。肺部病灶可轉移到皮下組織,形成膿腫、潰瘍和多發性瘺管,也可擴散到其他器官,如引起腦膿腫、腹膜炎等。表現為化膿性肉芽腫樣改變,在感染的組織內及膿汁內也有類似“硫磺樣顆粒”,呈淡黃色、紅色或黑色,稱色素顆粒。巴西諾卡菌可因侵入皮下組織,引起慢性化膿性肉芽腫,表現為腫脹、膿腫及多發性瘺管,好發於腿部,稱為足分枝菌病。
奴卡菌感染常可發生在一些進行性疾病或免疫障礙性疾病患者的晚期尤其是柯興綜合症、糖尿病或長期應用皮質激素、免疫抑製及廣譜抗生素患者。但約一半病人並無預先存在的疾病。本病已被認為是晚期艾滋病患者的一種機會性感染.其他諾卡菌有時也可引起局部或偶也可是全身性的感染。
二、細菌的生物學特性
奴卡菌為革蘭氏陽性杆菌,有細長的菌絲,菌絲末端不膨大。色素小顆粒壓碎染色鏡檢,可見顆粒呈菊花狀。抗酸染色為弱陽性,在鹽酸酒精種較長時間可完全脫色,這可與結核杆菌相區別。本菌屬為專性需氧菌。在普通培養基或沙氏瓊脂培養基中可緩慢生長,需5~7天可見菌落大小不等,表麵有皺褶,顆粒狀;不同種類可產生不同色素,如橙紅、粉紅、黃、黃綠、紫以及其他顏色。在培養的早期菌體裂解為較多的球菌或杆菌狀,分枝狀菌絲較少。菌絲直徑為1μm或更小。若培養時間較長,則菌絲易斷裂,可見有豐富菌絲體形成。
星形諾卡菌菌落表麵無白色菌絲;巴西諾卡菌菌落表麵有白色菌絲生長。在液體培養基中常在表麵生長形成菌膜,下部液體澄清。
三、細菌的實驗室檢查及其它檢查
1、塗片鏡檢 根據膿、痰塗片和壓片檢查,可見有革蘭陽性和部分抗酸性分枝菌絲若見散在的抗酸性杆菌,應與結核分枝杆菌相區別。
2、分離培養:標本接種分離可用沙保培養基或腦心浸液瓊脂平板置37℃培養。因星形諾卡菌在 45℃時生長,故溫度可有初步鑒別意義。培養24—48h後有小菌落緩慢出現,淡黃色粗顆粒樣,邊緣陷入培養基中,表麵幹燥,白色或淡黃色。時間延長則菌落皺折、堆疊如皮革樣,表麵有天鵝絨樣氣中菌絲體。
需注意,諾卡菌入侵肺部後由於巨噬細胞等免疫因素的作用下可使之變為L型。因此,常需反複檢查才能證實。有人將豚鼠諾卡菌注入112隻小鼠鼻腔均能引起急性致死性肺炎。死鼠肺勻漿接種在心腦浸液瓊脂平板不易分離出病原菌,但在高滲培養基上均能分離出L型。
3、生化鑒定 利用API20係統進行鑒定。
4、其他檢查 X線檢查或其他影像檢查可發現器官局部病變。
四、細菌的防治
由星形諾卡菌引起的諾卡放線菌病,若不治療常致死。用適宜抗生素治療的病人中死亡率最高的(>50%)是有彌漫性感染伴免疫受損的病人,最低的(15%死亡率)是免疫功能正常並且病變局限於肺部的病人。因為大多數病例對治療反應緩慢,氨苯磺胺的劑量應維持血濃度12~15mg/dl(如磺胺嘧啶4~6g/d口服)連續數月。TMP-SMZ或單獨大劑量氨苯磺胺(磺胺嘧啶或磺胺異噁唑)也可應用。若對磺胺類過敏或出現難治性感染,可用丁胺卡那黴素,四環素,亞胺培南,頭孢曲鬆,頭孢噻肟或環絲氨酸。
局部治療主要為手術清創,切除壞死組織。各種感染應用磺胺藥治療。有時還可加用環絲氨酸。一般治療時間不少於6周。
五、細菌的生物安全防護
根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)奴卡菌屬於三類,BSL-2。相關的防護事宜包括:
(1)操作要求
1、實驗時,未經實驗室主任同意,限製或禁止進入實驗室。
2、不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區域以外專用櫥櫃或冰箱中。
3、所有的操作過程應盡量細心,避免產生和濺出氣溶膠。
4、對於汙染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。
5、注射和吸取感染材料時,隻能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進行人工處理,要不將之小心放入不會被刺穿的、用於收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉移至處理區消毒,最好高壓殺菌。
6、打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛汙染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應按照相關的規定進行消毒。
7、所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前,均應使用可行的消毒方法進行消毒,如高壓滅菌。轉移到就近實驗室消毒的物料應置於耐用、防漏容器內,密封運出實驗室。離開該係統進行消毒的物料,在轉移前應包裝,其包裝應符合有關的法規。
8、濺出或偶然事件中,明顯暴露於傳染源時,要立即向實驗室主任報告。進行適當的醫學評估、觀察、治療,保留書麵記錄。
9、按日常程序、在有關傳染源的工作結束後、尤其是傳染源濺出或灑出後、或受到其他傳染源汙染後,實驗室設備和工作台麵應當使用有效的消毒劑消毒。汙染的設備在送去修理、維護前,要按照相關的規定消毒;在離開設施轉移前,要按照相關的規定打包運輸。
(2)安全設備
1、正確使用和保養生物安全櫃、最好是二級生物安全櫃、或其他合適的人員防護設施、或物理遏製裝置。
2、確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。
3、涉及高濃度或大體積的傳染源時,若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機,若轉頭或安全罩僅在生物安全櫃中打開,則可在開放實驗室內離心。
4、當必須在生物安全櫃外處理標本時,需采取麵部保護措施(跟鏡、口罩、麵罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到麵上。
5、在實驗室內,必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或製服。人員到非實驗室區域時,防護服必須留在實驗室內。防護服可以在實驗室內處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。
6、可能接觸潛在傳染源、被汙染的表麵或設備時,要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重複使用,不能用於接觸“潔淨”的表麵(鍵盤、電話等),也不應當戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套後,要洗手。
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