(一)花器官培養
花器官培養指整個花器及其組成部分如花托、花瓣、花絲、花柄、子房、花藥等的無菌培養。子房和花藥培養另有專門敘述。
應用:理論上通過離體花芽培養可了解整體植物和內源激素在花芽性別決定中所起的作用。可以了解花器各部分對果實和種子發育的作用,以及內、外源激素在果實種子發育過程中的調控作用。生產上可用於珍貴品種的擴大繁殖。培養方法如下:
1.取材 從健壯植株上取未開放的花蕾,已經開花的不宜用,因為消毒困難。先用75%酒精消毒約30秒鍾,再用飽和漂白粉浸10~15分鍾,取出用無菌水衝洗數次。
2.接種培養 用整個花蕾培養時,隻要把花梗插入培養基中。若用花器,則分別取下切成小片。
I)培養基: MS、B5等。若讓花器官育成小植株,要用誘導培養基,加入生長激素和細胞分裂素,先形成愈傷組織或胚狀體,再分化培養成植株。如菊花的花瓣片接在含6-BA 2mg/L、NAA 0.2的MS培養基上,形成少量愈傷組織。再經1個月就分化出綠色芽點,再切割轉接,可形成大量無根苗,用於繁殖。
II)26℃ 1500Lx光照,每天光照10小時,培養約2周,
(二)種子培養
種子培養是指受精後發育完全的成熟種子和發育不完全的未成熟種子的無菌培養。這項技術廣泛地應用於花卉、蔬菜、果樹、農作物等的種子培養之中。
優點:可以打破種子休眠,特別對一些休眠期長的植物;可以作為大量生產試管苗的好材料,它分化容易,無菌操作方便。可使遠緣雜交產生的雜種敗育種子,正常萌發產生第二代植株。培養技術如下:
1.種子滅菌 種皮厚或不飽滿的種子,宜用0.1%升汞消毒10~20分鍾。幼嫩的或發育不全的種子,宜用飽和漂白粉消毒15~30分鍾。若種子上有絨毛或蠟質,應先用95%酒精或吐溫40處理,提高消毒效果。對殼厚難萌發的種子,可去殼培養。
2.培養基 若以種子萌發為目的,培養基可不加或少加生長激素。對某些發育不全的無胚乳的種子培養,應提供適當的生長激素。種子培養的糖濃度可稍低,一般1~3%。
3.接種培養 種子培養的接種較容易,每瓶3~5粒,均勻排列,
4培養條件:20~28℃,1000~2000Lx光強,每天光照10小時。
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