布氏杆菌傳染性大，要注意防止實驗室汙染。
（一）分離培養
急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接種於雙相肝浸液培養基（一半斜麵，一半液體）置37℃10%CO2環境中培養，每隔2天檢查一次，如無細菌生長則搖蕩培養基，使液體浸過斜麵上，有細菌生長，可依鑒定項目確定是否為布氏杆菌。經一月培養無細菌生長，可報告陰性。
（二）血清學檢查
通常作凝集試驗，判定凝集效價1：50可疑，1：100以上為陽性。效價增高4倍以上時，更有診斷價值。
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